Basit Boyama Nedir? En İyi Özellikler



basit boyama Tek bir boya kullanılan hızlı ve basit bir boyama işlemidir, bu yüzden basit denir. Temel olarak bir örnekte bulunan hücrelerin morfolojisi ve organizasyonunu belirlemek için kullanılır.

Doğal olarak hücrelerin rengi yoktur, bu nedenle mikroskopta gözlendiklerinde bir şekilde görünmelerini sağlamak gerekir..

Basit boyamada kullanılan boyaların pozitif yük (katyonik) ile bazik olması gerektiğini, böylece hücre duvarına ve sitoplazmaya kendiliğinden bağlanabileceklerini vurgulamak önemlidir..

Bu hücresel yapılar negatif olarak yüklenmiştir. Bu nedenle, pozitif yüklü boya, hücrelere çekilir ve kendiliğinden kendilerine bağlanır. Böylece, bir numunede bulunan tüm hücreler hızla renklendirilir.

Basit boyamada kullanılan boyalar

Mikrobiyoloji laboratuvarında kullanılabilecek birkaç temel boya vardır. En çok kullanılanlar:

- Metilen mavisi.

- Kristal menekşe.

- Malakit yeşili.

- Temel fuşsin.

Tüm bu boyalar bakterilerde iyi çalışır, çünkü pozitif yüklü (katyonik) renkli iyonları (kromoforlar) vardır..

Bu boyaların çoğu için boyama süreleri nispeten kısadır. Boyanın afinitesine bağlı olarak genellikle 30 saniye ile 2 dakika arasında değişirler..

Basit boyama ile bir numuneyi boyamadan önce, cam sürgünün (sürgü) uzatılması ve sabitlenmesi gerektiği akılda tutulmalıdır; Genişletilmiş ve sabit örnek smear denir.

Basit bir boyama gerçekleştirmek için 6 adım

1. adım

Sürgüyü bir boyama rafına yerleştirin ve istenen boyayı uygulayın. Karşılık gelen zaman bırakın.

Normalde, basit boyama kullanılan renge bağlı olarak birkaç saniye veya birkaç dakika sürer..

gözlem

Bu aşamada, kullanılan boya için önerilen süreyi aşmamak önemlidir, çünkü tabakalar üzerinde kristaller oluşabilir, hücrelerin morfolojisini bozan "artefaktlar" olarak bilinen şeyi üretebilirler..

2. adım

Lamın lekesini bir şişeden damıtılmış suyla ya da akış şeffaf hale gelinceye kadar yavaşça akan musluk suyuyla dikkatlice yıkayın. Bu genellikle 5 ila 10 saniye sürer.

gözlem

Aynı kuvvetin numuneye zarar vermesini önlemek için, su akışını doğrudan yaymanın üzerine uygulamayın.

Damıtılmış suyunuz yoksa, musluk suyunu herhangi bir sorun olmadan kullanabilirsiniz, çünkü boyama sonucunu etkilemeyecektir..

3. adım

Slaytı emici kağıt havlularla bir yönde ve ovalamadan kurulayın. Slaytın alt kısmının temiz olduğundan emin olun..

4. adım

Mikroskopta lekeli smear gözlemleyin. Gözlemlemek istediğiniz alanı daha ayrıntılı olarak belirlemek için en uzak hedeflerle başlayın. Örneğe yaklaşma ve yaklaşma hedefini değiştirin.

gözlem

Lensin en yüksek büyütme oranına (normal olarak 100X) kullanımı için, ışığın daha iyi nüfuz etmesine ve görüntünün daha keskin olmasına yardımcı olması için daldırma yağı kullanılmalıdır. Bir lamel kullanmak gerekli değildir.

5. Adım

Son olarak, tüm numuneleri uygun şekilde "biyolojik tehlike" olarak etiketlenmiş uygun bir kapta atın..

referanslar

  1. (2001). Mikrobiyolojik Uygulamalar: Genel Mikrobiyolojide Laboratuvar Rehberi (8 inci ed.). McGraw-Hill Şirketleri.
  2. Harisha, S. (2006). Pratik Biyoteknolojiye Giriş (1st). Firewall Media.
  3. Moyes, R.B., Reynolds, J., & Breakwell, D.P. (2009). Bakterilerin ön boyaması: Basit lekeler. Mikrobiyolojide Güncel Protokoller, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamo'nın Mikrobiyolojinin Laboratuvar Temelleri (10inci). Jones & Bartlett Öğrenme.
  5. Prescott, H. (2002). Mikrobiyolojide Laboratuar Egzersizleri (5 inci). McGraw-Hill Şirketleri.
  6. Sumbali, G. ve Mehrotra, R. (2009). Mikrobiyolojinin İlkeleri (1st). Tata McGraw-Hill Eğitim.