Soya suyu tripticaseína vakfı, hazırlanması ve kullanımı

soya suyu tripticaseína Çok besleyici ve seçici olmayan bir sıvı kültür ortamıdır. Çok yönlülüğü nedeniyle, mikrobiyoloji laboratuvarında en çok kullanılan sıvı kültür ortamlarından biridir..

Ayrıca kısaltması İngilizce olan kısaltması için TSB olan et suyu tripticasa soyası veya sindirilmiş kazein-soya olarak da bilinir. Ben Tryptic İspanyolca kısaltması için Broth veya CST. Kullanımları, kompozisyonu nedeniyle çok değişkendir. Triptein, soya peptonu, sodyum klorür, dipotasyum fosfat ve glukozdan oluşur.

Beslenme gerektiren ve anaerobik bakteriler dahil, klinik olarak önemli patojenik bakterileri çoğaltma yeteneğine sahiptir. Bazı fırsatçı mantarlar ve kirleticiler bu ortamda da gelişebilir.

Besin gücü yüksek olduğundan mikrobiyal kontaminasyonu tespit etmek için yüksek hassasiyete sahiptir, bu nedenle aşıların mikrobiyolojik analizi için USDA Hayvan ve Bitki Sağlığı Muayene Servisi tarafından seçilmiştir..

Benzer şekilde, triptikaz soya çorbası, kozmetik ve gıda gibi endüstriyel seviyedeki ürünlerin mikrobiyolojik incelemesi için farklı farmakopelerin (Avrupa EP, Japon JP ve Kuzey Amerika USP) gereksinimlerini karşılar.

Öte yandan, bu cihazın kullanımına rağmen bu ortamın nispeten ucuz olduğunu, bu nedenle çoğu mikrobiyoloji laboratuarı için uygun olduğunu belirtmekte fayda var. Ayrıca hazırlanması çok kolaydır.

indeks

• 1 Vakfı
• 2 Hazırlık
  • 2.1 Trypticamine soya fasulyesi
  • 2.2-Triptikazin soya suyunun değişkenleri
• 3 kullanım
• 4 Tohumlu
• 5 kalite kontrol
• 6 Sınırlamalar
• 7 Kaynakça

vakıf

Üçlü, pepton ve glikoz, hızlı bir mikrobiyal gelişme için ideal bir ortama dönüştürmesi için ona temel besleyici özellikleri sunar..

Mikroorganizmaların çoğunda yaklaşık 6 ila 8 saatlik inkübasyonda büyüme görülmüştür. Ancak, günlerce büyümesi için sürebilen yavaş büyüyen suşlar vardır..

Sodyum klorür ve dipotasyum fosfat sırasıyla ozmotik denge ve pH düzenleyici görevi görür. Büyümenin varlığı, ortamdaki bulanıklığın ortaya çıkmasıyla kanıtlanır; Büyüme yoksa orta yarı saydam kalır.

Açık renginden dolayı, ürünün ürettiği pigmente tekabül eden, eşyanın başında yer alan resimde gösterilenler gibi pigmentlerin üretimini gözlemlemek mümkündür. Pseudomonas aeruginosa. 

hazırlık

-Tryptic soya suyu

Triptikaz soya et suyunu hazırlamak için, dijital ölçekte 30 gram kurutulmuş ticari besiyerini tartın. Sonra bir fiola içinde bulunan bir litre damıtılmış su içinde çözünür.

Karışım 5 dakika bekletilir ve daha sonra besiyerinin çözünmesine yardımcı olmak için bir ısı kaynağına getirilir. 1 dakika kaynatılırken sık sık çalkalanmalıdır..

Çözündükten sonra, gerektiği kadar uygun boyuttaki tüplere dağıtılır. Pamuk tapalı veya bakalit başlıklı tüpler kullanılabilir. Daha sonra tüpler, otoklavdaki ortam ile 121 ° C'de 15 dakika boyunca sterilize edilir.

Ortamın pH'ı 7.3 ± 0.2 olmalıdır

Susuz kültür besiyerinin renginin açık bej olduğu ve kuru bir yerde 10 ila 35 ° C'de saklanması gerektiği dikkate alınmalıdır. Hazırlanan et suyu açık sarı renktedir ve buzdolabında saklanmalıdır (2 - 8 ° C).

-Triptikazin soya suyunun varyasyonları

Trypticamine modifiye soya suyu, izolasyonu için seçici yapmak amacıyla safra tuzları ve novobiosin eklenerek hazırlanabilir. E. coli. Aynı amaç için başka bir seçenek vankomisin, sefiksim ve tellürit (2.5 μg / ml) ile desteklenmiş triptikaz soya suyu hazırlamaktır..

Öte yandan, amaç biyofilm oluşumunu teşvik etmek olduğunda, triptikazin soya suyuna daha fazla glikoz (% 0.25) eklenebilir..

kullanım

Gibi zorlu veya sinir bozucu bakteri büyümesini sağlayacak kadar besleyici Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp ve Brucella sp, kan veya serum ile takviye gerek yok.

Aynı şekilde, bu çorbadaki bazı mantarlar da gelişebilir. Candida albicans kompleksi, Aspergillus sp ve Histoplazma capsulatum.

Ek olarak, anaerobik koşullar altında bu ortam, Clostridium cinsine ait bakterileri ve ayrıca klinik öneme sahip anaerobik sporüle edilmemiş bakterileri geri kazanmak için idealdir..

Eklenirse, Enterococcus ve diğer D Grubu Streptokokların gelişimi için% 6.5 sodyum klorür kullanılabilir..

Araştırma düzeyinde, çeşitli protokollerde, özellikle biyofilm veya biyofilm oluşturan bakterilerin çalışılmasında çok faydalı olmuştur. Bakteriyel süspansiyonu, Kirby ve Bauer yöntemiyle antibiyogram yapmak için gerekli olan Mac Farland'ın% 0,5'inde hazırlamak için de kullanılır..

Bu durumda, benzer görünüme sahip 3 ila 5 koloni alınır ve 4-5 ml triptikazin soya suyu içinde emülsiyon haline getirilir. Daha sonra 35-37 ° C'de 2 ila 6 saat inkübe edilir ve daha sonra steril salin kullanılarak istenen konsantrasyona ayarlanır. Trypticase soya çorbaları, 18 ila 24 saat inkübasyon için kullanılmamalıdır..

ekili

Örnek doğrudan ekilebilir veya seçici ortamdan alınan alt kültürlenmiş saf koloniler verilebilir. İnokulum inkübasyondan önce ortamı bulanıklaştırmayacak şekilde küçük olmalıdır.

Normalde 37 ° C'de aerobiyozda 24 saat kuluçkada kalır, ancak bu koşullar aranan mikroorganizmaya bağlı olarak değişebilir. Gerekirse anaerobik koşullarda 37 ° C'de birkaç gün inkübe edilebilir. Örneğin, zorlu veya yavaş büyüyen mikroorganizmalar 7 güne kadar inkübe edilebilir.

Aşı olarak kullanılan farmasötik maddelerin mikrobiyolojik analizlerinde protokoller daha katıdır. Bu durumlarda, 14 gün sürekli inkübasyona ulaşana kadar büyümesi olmayan et suyu atılmaz.

Kalite kontrol

Hazırlanan her parti için 1 veya 2 tüp sterilite göstermek için inokülasyon olmadan inkübe edilmelidir. Değişmeden kalmalı.

Davranışlarını değerlendirmek için bilinen suşları da dikebilirsiniz. Kullanılabilecek suşlar arasında:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 veya 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Her durumda, büyüme, her mikroorganizma için uygun atmosfer ve sıcaklık koşulları altında tatmin edici olmalıdır..

sınırlamaları

-Glikozun fermantasyonu, asitlerin üretilmesiyle besiyerinin pH'ının düşmesine neden olur. Asitliğe duyarlı bazı mikroorganizmaların hayatta kalması için bu olumsuz olabilir.

-Suşların bakımı için önerilmez, çünkü asitlemeye ek olarak, birkaç gün sonra bakteri, çevreyi elverişsiz kılan toksik maddelerin birikmesi ile besinleri tüketir..

-Et suyu kolayca kontamine olduğundan, tüm sterilite protokollerinin bakımı için özen gösterilmelidir..

-Triptikazinin hazırlanmasından sonra soya et suyu, et suyu başka bir steril tüpe aktarılmaya çalışılmaz, çünkü bu tür manevralar kontaminasyona karşı çok hassas.

referanslar

1. Cona E. Agar difüzyon testi ile iyi bir duyarlılık çalışması için koşullar. Rev. chil. infectol. 2002; 19 (2): 77-81. Erişim: scielo.org
2. İngiliz Laboratuvarı Tryteine ​​soya suyu 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
3. MCD Laboratuvarı. Trytica soya suyu. En uygun fiyat: elektronik-sistems.com
4. Neogen laboratuvarı. Soya suyu üçlüsü. Erişim: foodsafety.neogen.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'un mikrobiyolojik tanısı. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Arjantin.
6. Rojas T, Vásquez Y, Reyes D, Martínez C, Medine L. Geri kazanım için manyetik immünos ayrılma tekniğinin değerlendirilmesi Escherichia coli O157: H7 süt kremasında. ALAN. 2006; 56 (3): 257-264 sayılı belgeler. Erişim: scielo.org.ve
7. Gil M, Mercan K, Quevedo G, Sánchez A, Nicita G, Rojas T, Sánchez J, Finol M. İzole biyofilm oluşumu Staphylococcus aureus antimikrobiyal duyarlılık ve klinik provenansa göre. Vitae. 2015; 62 (1): 1-8. Mevcut adres: saber.ucv.ve
8. Narváez-Bravo C, Carruyo-Núñez G, Moreno M, Rodas-González A, Hoet A, Wittum T. İzolasyonu Escherichia coli O157: Miranda Belediyesi, Zulia Eyaleti, Venezuela'dan Çift Amaçlı Sığır Sığırlarının Dışkı Örneklerinde H7. Rev. Cient. (Maracaibo), 2007; 17 (3): 239-245'te açıklanmaktadır. Erişim: scielo.org