Selenite et suyu temelleri, hazırlanması ve kullanımı

selenit suyu Seçici bir sıvı kültür ortamıdır. Salmonella cinsinin enteropatojenik bakterilerinin varlığından şüphelenilen örneklerin zenginleştirilmesi için Leifson tarafından tasarlanmıştır..

Bu ortam Amerikan Halk Sağlığı Birliği'nin (APHA) gereksinimlerini karşılar ve bu nedenle dışkı örneklerinde Salinella varlığının araştırılması için kabul edilir, idrar, sıvı veya katı gıdalar, su ve diğerleri..

Sahip olduğu kimyasal bileşim, bu mikroorganizmaların geri kazanılmasını kolaylaştırır ve diğerlerinin büyümesini engeller. Enterobacteriaceae familyasına ait çoğu bakteri için esas olarak toksiktir. Bununla birlikte, aynı zamanda Shigella suşlarının geri kazanılmasını sağlar ve Pseudomonas ve Proteus'un büyümesini inhibe etmez..

Susuz sodyum hidrojen selenit, susuz sodyum fosfat, peptonlar ve laktozdan oluşur. Ayrıca sistinin eklendiği bir varyant vardır, bu nedenle adı selenit-sistin suyu.

Günümüzde, selenit-sistin et suyunun kullanılması tercih edilir, çünkü daha yüksek bir Salmonella geri kazanım yüzdesi, Tetrathionat sodyum et suyu gibi aynı amaca sahip diğer seçici ortamlarla gözlenene eşdeğer miktarda elde edilir..

indeks

• 1 Vakfı
• 2 Hazırlık
  • 2.1 - Selena
  • 2.2 -Ticari ortamın hazırlanması
  • 2.3 Varyant selenit-sistin suyu
• 3 Kullanım
• 4 Tohumlu
• 5 kalite kontrol
• 6 Sınırlamalar
• 7 Kaynakça

vakıf

Et suyunda bulunan peptonlar, mikroorganizmaların doğru gelişmesi için besin maddesi olarak görev yapar. Salmonella suşları azot, vitamin ve amino asit kaynağı olarak peptonları kullanır.

Laktoz, mayalanabilir karbonhidrattır, sodyum selenit, Gram pozitif bakterilerin ve bağırsak florasındaki, özellikle Enterobacteriaceae familyasının bağırsak florasındaki çoğunun çoğalmasını yavaşlatan inhibe edici maddedir. Sodyum fosfat, ortamın pH'ını stabilize eden tampondur.

L-sistin içeren selenit et suyu varyantı durumunda, bu ilave bileşik, selenitin toksisitesini en aza indiren ve Salmonella'nın geri kazanımını artıran bir indirgeyici ajandır..

hazırlık

-Selenite suyu

Karışımın bileşenlerine sahipseniz, aşağıdakileri tartabilirsiniz:

4 gr susuz sodyum hidrojen selenit.

10 g susuz sodyum fosfat.

5 gr karabiber.

4 gr laktoz.

Bileşikleri 1 litre steril damıtılmış su içinde çözün. Bütünüyle çözünmesi için hafifçe ısıtılabilir..

Bazı laboratuvarlar, ortamı sterilize etmek için 10 dakika boyunca akıcı buharda maruz bırakır, çünkü otoklav kullanılmamalıdır. Ortam sterilize edilmişse, kullanılıncaya kadar buzdolabında saklanabilir.

Sterilize edilmeden ve steril test tüplerine doğrudan 10 ila 15 ml servis yapmadan da hazırlanabilir.

Bu durumda hemen dinlenmeye bırakılmalı ve hemen kullanılmalıdır. Ortam steril olmadığından, daha sonra kullanmak üzere buzdolabında saklanamaz..

-Ticari ortamın hazırlanması

Ticari ortam varsa, 23 g susuz ortam tartılır ve bir litre steril damıtılmış su içinde eritilir. Çözünmeyi bitirmek için kısaca ısıtın. Otoklavda sterilize etmeyin. Steril test tüplerinde aseptik olarak 10 veya 15 ml servis yapın.

Ortamın nihai pH'ı 7,0 ± 0,2 olmalıdır.

Susuz ortamın renginin bej olduğu ve preparatın saydam ve yarı saydam kehribar olduğu belirtilmelidir..

Varyant selenit-sistin suyu

Selenit et suyunun aynı bileşiklerini içerir, ancak 10 mg sistin eklenir. Prosedürün geri kalanı, yukarıda tanımlandığı gibidir..

uygulamaları

Bu ortam epidemiyolojik çalışmalarda, hastalığın akut aşamasında olmadığı durumlarda, asemptomatik hastalar veya sağlıklı taşıyıcılar için özeldir.

Salmonella cinsinin izolasyonu genellikle zordur, çünkü genellikle örnekleri kıt bir şekilde kirlettiği görülür. Küçük miktarlarda olmak, daha fazla miktarda bulunan diğer bakteri türlerinin büyümesiyle kolayca örtüşebilir.

Öte yandan, işlenmiş gıdaların işlendiği hammadde çoğu zaman ısıya, dehidrasyon işlemlerine, dezenfektanların, radyasyonun ve koruyucuların kullanımına, diğerlerine karşı maruz bırakılmaktadır..

Bu nedenle, hammaddede bulunan Salmoneller, söz konusu endüstriyel işlemlere ürünün verilmesiyle kötü muamele görürler. Aynı şekilde, dışkı gibi klinik örnekler söz konusu olduğunda, suşları antibiyotik ile tedavi edilmiş hastalardan geliyorsa zayıf olabilir..

Bu nedenle, Salmonella'nın varlığından şüphelenilen herhangi bir numunenin, laktoz et suyunda önceden zenginleştirilmesi ve daha sonra SS agar, ksiloz agar, lisin deoksikolat (XLD) gibi seçici ortamlarda geri kazanımının optimize edilmesi için selenit suyunda zenginleştirilmesi gerekir. ), enterik Hektoen agar (HE) ve yeşil-parlak agar, diğerleri arasında.

ekili

Dışkı örnekleri için 1 g örnek alın ve 10 ila 15 ml selenit suyu içeren bir tüpte süspansiyon haline getirin. Dışkı sıvı ise, 1 ml alın ve suyu içinde askıya alın. Rektal swablar için swab malzemesini et suyu içine boşaltın.

Katı gıda örneklerinde 1 gr alın ve selenit çorbasında süspansiyon haline getirin.

Sıvı gıdalarda, eşit konsantrasyonlarda selenit suyu ile iki konsantrasyonda karıştırın.

İdrar örnekleri santrifüj için, süpernatantı atın, tüm çökeltileri alın ve selenit et suyunda askıya alın.

Et suyu, 24 saat inkübasyon için 37 ° C'de inkübe edilir. Bakteriyel büyüme, bulanıklık ile kanıtlanır. Numune başına ilave bir tüp de 42 ° C'de inkübe edilebilir. Daha sonra selenit et suyundan seçici katı ortam ekin.

Kalite kontrol

Steriliteyi kontrol etmek için inokülasyon olmadan her partiden bir selenit suyu, 24 saat boyunca 37 ° C'de inkübe edilir. Bulanıklığın veya ortamın renginin değişmemesi bekleniyor.

Ortamın iyi işleyişini kontrol etmek için, bilinen suşlar, örneğin:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 ve Proteus mirabilis ATCC 43071.

Beklenen sonuçlar:

• İlk üç bakteri suşu için, büyüme tatmin edici olmalıdır.
• için Escherichia coli kısmi engelleme.
• Proteus ılımlı büyüme için.

sınırlamaları

Orta selenit suyu insan cildi için toksiktir, bu nedenle doğrudan temastan kaçınılmalıdır.

referanslar

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. Her ikisi de 37 ° C ve 42 ° C'de kuluçkalanan sodyum selenit ve tetrationat kültür ortamı arasındaki karşılaştırma izolasyonu zehirlenmeye neden olan mikrop taşıyıcı dışkı tabure. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. Laboratuvarlar Britania. Selenito Caldo. 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
3. Neogen Laboratuvarları Selenito suyu Erişim: foodsafety.neogen.com
4. González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Valela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. Mikrobiyolojik izolasyonu Salmonella spp. ve tespiti için moleküler araçlar. Sağlık, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Erişim: http://www.scielo.org.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'un mikrobiyolojik tanısı. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Arjantin.