Vogel-Johnson Agar Vakfı, hazırlanması ve kullanımı

Vogel-Johnson agar özel olarak izolasyonu için formüle edilmiş sağlam, seçici ve farklı bir kültür ortamıdır. Staphylococcus aureus. Bu ortam 1960 yılında Vogel ve Johnson tarafından 1955'te Zebovitz, Evans ve Niven tarafından formüle edilen glisin tellürit agarının modifikasyonundan oluşturulmuştur.

Modifikasyon, ortamda bulunan mannitol konsantrasyonunun arttırılmasından ve bir pH indikatörünün dahil edilmesinden oluşuyordu. Mevcut formül, triptein, maya özütü, mannitol, dipotasyum fosfat, lityum klorür, glisin, fenol kırmızısı, ağar,% 1 potasyum tellürit çözeltisi ve sudan oluşur..

Vogel-Johnson agar gibi, izolasyonu için seçici olan başka araçlar olduğu da belirtilmelidir. S. aureus, tuzlu mannitol agarı ve Baird Parker agarı gibi. Bu anlamda Vogel-Johnson agarının kuruluşunun, tuzlu mannitol agarı ile Baird Parker agarı arasındaki karışımı olduğu söylenebilir..

İlk kolonileri S. aureus Mannitol fermantasyonu ve pH göstergesini sarıya çevirerek ayırt edilirler. Öte yandan, ikincisinde S. aureus tellürün tellüruma indirgenmesi ve gri ila siyah koloniler oluşturulması ile karakterize edilir. Her iki özellik de Vogel-Johnson agarında gözlenir..

Bu ortam, benzerleri gibi, Staphylococcus aureus Gıda numunelerinde, endüstriyel ürünlerin hijyen kontrolü ve klinik numunelerde.

indeks

• 1 Vakfı
  • 1.1 Besinlerin Katkısı
  • 1.2 Seçici güç
  • 1.3 Diferansiyel güç
  • 1.4 Ozmotik denge ve katılaşma maddesi
• 2 Hazırlık
  • % 2.1 a / a potasyum tellürit çözeltisi
  • 2.2 Vogel-Johnson agar baz ortamı
• 3 kullanım
• 4 kalite kontrol
• 5 Kaynakça

vakıf

Besin katkısı

Vogel-Johnson ortamı, triptein ve maya özütü içerir; Her iki madde de bakteri üremesi için gerekli karbon ve azot kaynağı olarak görev yapan uzun zincirli amino asitler sağlar. Bu ortamda çoğalabilen bakteri, bu maddeleri besinlerden alır..

Seçici güç

Vogel-Johnson agar, koagülaz pozitif stafilokokların gelişimini destekleyen, Gram negatif bakterilerin ve hatta bazı Gram pozitif bakterilerin gelişimini önleyebilir. Önleyici maddeler potasyum tellürit, lityum klorür ve glisindir.

Diferansiyel güç

Bu diferansiyel ortamı yapan maddeler mannitol ve potasyum tellürittir. Mannitol bir karbonhidrattır ve fermente edildiğinde, fenol kırmızısı pH göstergesinin varlığı sayesinde meydana gelen besiyerini kırmızıdan sarıya dönüştüren asitler üretilir..

Metalik serbest tellürde azaldığında renksiz tellürit, koyu gri ila siyah rengini alırken.

Staphylococcus aureus mannitol fermente olur ve tellürit için tellürit azalır. Bu yüzden tipik kolonileri S. aureus bu besiyerinde gri veya siyah sarılı bir besiyeri.

Bu ortamda büyüyen ve tellürit veya fermente mannitolü azaltmayan bakteriler, ortamın peptonların kullanımıyla alkalinleştirilmesinden dolayı orijinal renkten daha yoğun, kırmızı bir ortamla çevrili şeffaf koloniler oluşturacaktır..

Öte yandan, tellüriti azaltan, ancak mannitol fermente etmeyen bakteri koyu kırmızı renkle çevrili gri veya siyah koloniler halinde büyüyecek.

Eğer ortam potasyum tellürit eklenmeden hazırlanmışsa, S. aureus tuzlu mannitol agarı gibi sarı bir ortamla çevrili sarı koloniler halinde gelişirlerdi..

Ozmotik denge ve katılaşma maddesi

Dipotasyum fosfat ortamın ozmotik dengesini korur ve pH'ı nötralite 7.2'ye ayarlar. Agar, kültür ortamına sağlam bir tutarlılık verirken.

hazırlık

% 1 potasyum tellürit çözeltisi, ağırlık / hacim

Bu çözelti kurutulmuş ortama dahil edilmemiştir, çünkü otoklavda sterilize edilemez. Bu nedenle ayrı olarak hazırlanır ve sterilize edilmiş ortama eklenir..

Bazı ticari evler kullanıma hazır% 1 potasyum tellürit çözeltisi satar. Laboratuarda hazırlamak istiyorsanız, aşağıdakileri yapın:

1.0 g potasyum tellürit tartılır ve 100 ml damıtılmış su ölçülür. Potasyumun tellüritini bir parça su içinde çözün ve ardından 100 ml'ye ulaşana kadar su miktarını tamamlayın. Çözelti filtrasyon yöntemi ile sterilize edilir.

Vogel-Johnson agar baz ortamı

Susuz ortamdan 60 g tartılır ve 1 litre damıtılmış su içinde çözülür. Karışım, tamamen çözünmeye yardımcı olmak için kaynamaya ısıtılır. Çözünme işlemi sırasında ortam sık sık çalkalanır.

Otoklavda 15 pound basınçta ve 121 ° C de 15 dakika sterilize edin. Otoklavdan çıkarın ve ortam yaklaşık 45 ila 50 ° C sıcaklığa ulaşana kadar beklemeye bırakın. % 1'e önceden hazırlanmış potasyum tellürit çözeltisinden 20 ml ekleyin.

Karıştırın ve steril petri kaplarına dökün. Kullanana kadar buzdolabında daha sonra depolamak için plaklarda ters çevrilmiş katılaşma ve sipariş verme.

Hazırlanan ortamın son pH değeri 7.2 ± 0.2 olmalıdır..

Bir örnek dikmeden önce, plaka ortam sıcaklığını alana kadar bekleyin.

Hazırlanan ortamın rengi kırmızıdır.

kullanım

İzolasyonu için kullanılabilir olmasına rağmen S. aureus Her tür numunede, çoğunlukla farmasötik ürünler, kozmetik ürünler ve yiyeceklerin mikrobiyolojik analizleri için kullanılır..

Aşığın yoğun olması tavsiye edilir. Tohumlama, platin kulp ile çizerek veya Drigalski spatula ile yüzeyle yapılabilir..

Plakalar 35-37 ° C'de 24 ila 48 saat aerobiyozda inkübe edilir.

Kalite kontrol

Vogel-Johnson besiyerinin kalite kontrolünü gerçekleştirmek için aşağıdaki kontrol suşları kullanılabilir:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 veya Proteus mirabilis ATCC 43071.

Beklenen sonuç aşağıdaki gibidir: S. aureus Sarı ortamla çevrili siyah kolonilerde tatmin edici büyüme. için S. epidermidis Kırmızı orta ile çevrili saydam veya siyah koloniler ile düzenli büyüme.

Aynı şekilde E. coli toplam inhibisyon olması bekleniyor ve Proteus mirabilis kısmi veya toplam inhibisyon; büyürse, çok dikkatli bir şekilde yapar ve koloniler orta kırmızı renkle çevrili siyah olur.

referanslar

1. BD Laboratuvarları. VJ (Vogel ve Johnson Agar). 2006. Erişim: bd.com
2. Laboratuvarlar Britania. Vogel-Johnson Agar. 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
3. Laboratuvarlar Britania. Potasyum tellürit. 2015. Erişim tarihi: britania.com
4. Himedia Laboratuvarı. Vogel-Johnson Agar Orta. 2018. Mevcut adres: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. Vogel-Johnson Agar Üssü. Merck Mikrobiyoloji El Kitabı. 12. Baskı, sf 502-503. Mevcut: Kullanıcılar / Takım / İndirmeler
6. Wikipédia'nın katkıları, "Ágar Vogel Jonhson", Wikipédia'dan ansiklopedik yaşa,   dağıtma em: wikipedia.org.
7. Venezüella Standart Covenin 1292-89. (1989). Gıda. İzolasyon ve sayma Staphylococcus aureus. Mevcut:sencamer.gob.ve