Parlak yeşil agar vakfı, hazırlanması ve kullanımı



parlak yeşil ağar yüksek bir seçicilik derecesine sahip katı bir kültür ortamıdır. Sadece Salmonella cinsinin suşlarının izolasyonunda kullanılır, ancak bu ortamda yetişmeyen typhi ve paratyphi türleri gibi bazı istisnalar vardır..

Salmonella cinsinin aranması dışkı, su veya yiyecek örneklerinde sıktır. Bu anlamda, bu ortam çok faydalı olabilir. Bu agar, 1925 yılında Kristensen, Lester ve Jurgens tarafından oluşturuldu ve daha sonra Kauffmann tarafından değiştirildi..

Hayvan dokusunun peptik sindiriminden ve kazeinin pankreas sindiriminden pluripeptonlardan oluşur, ayrıca maya özütü, sodyum klorür, laktoz, sakaroz, fenol kırmızısı, parlak yeşil ve agar-agar içerir.

Salmonella'nın büyümesini destekleyen birçok bakteri için çok daralan bir ortam olmasıyla karakterize edilir, ancak bazı koliformlar zayıf bir şekilde gelişerek içinde yaşayabilir..

Bu ortamda Shigella cinsinin büyümediğini ve her ikisinin de olmadığını vurgulamak önemlidir. Salmonella typhimurium, veya Salmonella paratyphi. Bu nedenle, bu mikroorganizmaların izole edilmesi isteniyorsa, diğerleri arasında XLD agar gibi başka araçlar kullanılmalıdır..

indeks

  • 1 Vakfı
    • 1.1 Parlak yeşil ağar
    • 1.2 Parlak yeşil ağar (BGA) çeşitleri
  • 2 Hazırlık
  • 3 Kullanımlar / uygulamalar
  • 4 kalite kontrol
  • 5 Kaynakça

vakıf

Parlak yeşil ağar

Ortamı oluşturan bileşenlerin her biri, agarın özelliklerini ve özelliklerini belirleyen belirli bir işleve sahiptir..

Pluripeptonas ve maya özütü, mikroorganizmaların gelişimleri için gerekli nitrojen ve mineralleri aldığı besin kaynağıdır. Laktoz ve sukroz, onları fermente edebilen mikroorganizmalar için enerji kaynaklarıdır..

Parlak yeşil, Gram pozitif bakterilerin ve çok sayıda Gram negatif mikroorganizmanın gelişimini önleyen inhibe edici maddedir.

Sodyum klorür, ortama ozmotik stabilite sağlar. Fenol kırmızısı pH'ın göstergesi iken, karbonhidrat fermantasyonundan asit üretimini tespit ederken renk açar.

Fermente olmamış laktoz ve sukroz kolonileri, kırmızı bir arka plan üzerinde beyaz bir renkte, pembe veya saydam olarak büyür. Örneğin, Salmonella cinsinin bakterileri.

Laktoz fermente edici bakteriler veya bu besiyerinde çoğalabilen sükroz, sarı-yeşil bir arka plan üzerinde yeşilimsi-sarı veya yeşilimsi-sarı koloniler geliştirir. Örneğin, Escherichia coli ve Klebsiella pneumoniae.

Parlak yeşil ağar (BGA) çeşitleri

Parlak yeşil ağarın başka varyantları da vardır; novobiocin green agar parlak glikoz (NBG) ve novobiocin agar parlak yeşil gliserol laktoz (NBGL).

Novobiocin agar parlak yeşil glikoz (NBG)

Triptikaz soya agarı, ferrik amonyum sitrat, sodyum tiyosülfat pentahidrat, fenol kırmızısı, glukoz, parlak yeşil, novobiyosin ve damıtılmış su içerir..

Dışkı örneklerinden Salmonella kolonilerinin izolasyonu için hizmet vermektedir.

Bu durumda parlak yeşil ve novobiyosin, Gram pozitif bakteri ve bazı Gram negatif mikroorganizmaların büyümesini önleyen inhibe edici maddelerdir..

Sodyum tiyosülfat, kükürt kaynağıdır ve ferrik sitrat, demir sülfürünün siyah bir çökeltisinin oluşması yoluyla hidrojen sülfit üretimini ortaya çıkarmak için gerekli olan demir kaynağıdır..

Glikoz fermente edilebilir bir karbonhidrattır ve fenol kırmızısı pH göstergesidir.

Bu ortamda Salmonella kolonileri, kırmızımsı bir halo ile çevrelenmiş siyah bir merkez ile ve ardından net bir görülebilir alanla geniş bir şekilde gelişir. Bazı suşları Citrobacter freundii Salmonella ile aynı kolonileri üretmek.

Parlak yeşil novobiocin agar gliserol laktoz (NBGL)

Bu besiyeri, triptikaz soya agarı, ferrik amonyum sitrat, sodyum tiyosülfat, laktoz, gliserol, parlak yeşil, novobiyosin ve damıtılmış su içerir..

Bu ortamın öncekiyle farkı, glukozun laktoz ve gliserol ile değiştirilmiş olması ve fenol kırmızısının kullanılmamasıdır..

Ortam ayrıca Salmonella türlerini izole etmek için kullanılır; koloniler hidrojen sülfür üretimi ile siyahlaşır.

Sadece gliserol veya laktozdan asit üretmeyen koloniler H üretimine ulaşır2Yeterli, çünkü düşük pH, H oluşumunu engelliyor2S. Bu, çoğu Proteus ve Citrobacter türü için renksiz kolonilere neden olur..

hazırlık

-Ticari olarak elde edilen susuz ortamın 58 gramını tartın. Bir litre damıtılmış suya ekleyin. Karıştırın, birkaç dakika bekletin ve hazırlığı tamamen eriyene kadar bir ısı kaynağına gönderin.

-121 ° C'de 15 dakika otoklavda sterilizasyon süresini geçmeyin.

-Dursun ve steril petri kaplarında bile sıcak servis yapın. Son pH 6.9 ± 0.2 olmalıdır.

-Sertleşmesine ve kullanana kadar buzdolabında saklanmasına izin verin. Ekimden önce plakaları oda sıcaklığında almalı.

-Toz ortam yeşildir ve pH'a ve ticari eve bağlı olarak turuncu-kahverengi veya kırmızımsı-yeşil bir renk almaya hazırdır. Çok kahverengi bir renk, agarın aşırı ısındığını gösterir.

-Agar katılaştırıldıktan sonra, ortam bozulurken, tekrar kullanılması tavsiye edilmez..

Kullanımlar / uygulamalar

Bu besiyeri, diğerlerinin yanı sıra dışkı örnekleri ve süt gıdalarından elde edilen Salmonella cinsinin suşlarının araştırılmasında kullanılır..

Oldukça daralan bir ortam olduğundan, doğrudan numune kullanılıyorsa bol miktarda inokulum ekmeniz önerilir. Aksi takdirde, numunelerin ön zenginleştirilmesi ve zenginleştirilmesi, bu besiyerine ekimden önce yapılmalıdır..

Bazı Salmonella suşları inhibe edildiğinde veya güçlükle büyüdüğü için, bu besiyerine Salmonella için diğer seçici agarlarla eşlik edilmesi önerilir..

Karakteristik Salmonella'ya sahip tüm koloniler kesin tanımlama için biyokimyasal testlere tabi tutulmalıdır.

Kalite kontrol

Parlak yeşil agar besiyerinin iyi işlediğini test etmek için, bunun üzerinde aynı gelişmeyi gözlemlemek için ATCC suşları kullanılabilir..

Kalite kontrolünde en sık kullanılan suşlar şunlardır: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

İlk 3, kırmızı bir arka plan üzerinde pembe veya şeffaf beyaz koloniler vermelidir. İyi gelişim gösteren Salmonella ve seyrek veya düzenli büyüme gösteren Proteus.

Klebsiella ve Escherichia'nın sarı arka plana sahip sarımsı-sarı koloniler olması beklenir ve Shigella ve Staphylococcus durumunda inhibe edilmelidir.

Susuz ortam oda sıcaklığında, kuru bir yerde muhafaza edilmelidir, çünkü ortam çok higroskopiktir.

referanslar

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratuvarı S.A. Parlak Yeşil Agar. 2009
  2. İngiliz Laboratuvarı Parlak Yeşil Agar. 2015.
  3. BD Laboratuvarı. BD Parlak Yeşil Agar. 2013.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik tanı (5. basım). Arjantin, Editör Panamericana S.A..
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott'un Mikrobiyolojik Tanısı. 12 ed. Arjantin. Panamericana S.A Editörden