Agar Salmonella-Shigella vakfı, hazırlanması ve kullanımı



Salmonella-Shigella agar SS agar olarak da bilinir, Salmonella ve Shigella cinsinin enteropatojenik bakterilerinin hem çevresel hem de klinik örneklerden izolasyonu için özel olarak tasarlanmış, orta derecede seçici ve diferansiyel bir ortamdır..

SS agarı karmaşık bir bileşime sahiptir; Et özü, pepton, laktoz, safra tuzları, sodyum sitrat, sodyum tiyosülfat, ferrik sitrat, ağar, nötr kırmızı, parlak yeşil ve damıtılmış sudan oluşur. Büyük seçiciliği göz önüne alındığında, bol miktarda karışık bitki örtüsü ile örnekleri dikmek mümkündür.

Mikrobiyoloji laboratuvarlarında, Salmonella-Shigella besiyeri, ishalli dışkı, lağım suyu, içme suyu ve yiyecek örneklerinde Salmonella ve Shigella'nın varlığını araştırmak için yaygın olarak kullanılmaktadır..

Bazen, Salmonella suşlarını geri kazanmak için zenginleştirme öncesi etkenleri (laktoz et suyu) ve zenginleştirmeyi (selenit sistin et suyu) kullanmak gerekir..

Bu adımlar, Salmonella'nın varlığının çok az miktarda olduğundan şüphelenildiğinde veya suşun, esas olarak işlenmiş gıdalar olmak üzere endüstriyel üretimin tipik süreçleriyle kötü muamele görmesi durumunda gereklidir. Ayrıca antibiyotik tedavisi alan hastalardan dışkı numunelerinin zenginleştirilmesi de önerilir..

Daha sonra, zenginleştirilmiş et suyu Salmonella-Shigella agar ve ksiloz agar, deoksisiloksan lisin (XLD) ve enterik Hektoen agar (HE) gibi diğer benzer ortamlara ekilebilir.

indeks

  • 1 Vakfı
    • 1.1 Beslenme gücü
    • 1.2 Tutarlılık
    • 1.3 Seçmeli
    • 1.4 Diferansiyel
  • 2 Hazırlık
  • 3 kullanım
  • 4 Sınırlamalar
  • 5 kalite kontrol
  • 6 Kaynakça

vakıf

Salmonella-Shigella kültür ortamının her bir bileşeni belirli bir işleve sahiptir ve bir bütün olarak karışım, onu karakterize eden özellikleri verir..

Besleyici güç

Et ekstraktı ve pepton (sindirilmiş kazein ve hayvan dokusu), kalan bileşenlerini tolere edebilen mikroorganizmaların gelişmesi için gerekli besinleri (nitrojenler, karbon ve vitaminler) sağlar..

tutarlılık

Agar-agar, ortama sağlam tutarlılık sağlamaktan sorumludur..

selektif

Bu ortam oldukça seçicidir çünkü safra tuzları, sodyum sitrat ve parlak yeşil içerir. Bu nedenle, bazı koliformlar dahil, tüm Gram pozitif bakterilerin ve Gram negatif basillerin çoğunun büyümesini engeller.

Salmonella cinsinin bakterileri ve Shigella'nın bazı türleri bu bileşikleri desteklerken.

Temel olarak, Salmonella cinsi safra tuzlarına karşı çok dirençlidir, öyle ki bakteri sürekli dışkı yoluyla dışarı çıkan bazı taşıyıcı hastaların safra kesesinde yaşayabilirler..

diferansiyel

Laktoz, laktoz fermente türlerini fermente edilmeyen türlerden ayırt etmeye yardımcı olan fermente edilebilir bir karbonhidrattır. Bu özellik, bu ortamda fenol kırmızısı olan pH indikatörünün varlığı ile kanıtlanır..

Laktoz fermente türleri, fermente edilmeyen türler renksiz iken kırmızı koloniler verir. Salmonella ve Shigella laktoz fermente etmediğinden bu özellik önemlidir..

Öte yandan, bu besiyeri bir kükürt kaynağı olarak sodyum tiyosülfat ve bir demir kaynağı olarak ferrik sitrat içerir. Her iki bileşik de hidrojen sülfit üretebilen bakterileri ayırt edebilir. Bunlar, çözünmeyen ve görünür ferrik sülfitin siyah bir çökeltisini oluşturmak üzere reaksiyona girer..

Bu özellik, Salmonella cinsinin bazı suşlarına sahiptir. Normalde kolonileri ortasında siyah nokta olan renksizdir. Salmonellas'ın geri kalanı H üretmez2S ve renksiz koloniler olarak gelişir.

Öte yandan, Shigella cinsinin kolonileri kararmadan renksiz düzdür..

hazırlık

Bu hazırlamak için çok basit demektir.

Susuz ticari besiyerinden 63 gr tartılır ve bir litre distile su içinde çözülür. Çözeltiyi ısıtın ve karıştırın. Karışım kaynar dakika kadar sürebilir.

Bu ortam otoklavlanmamalıdır. Çözündükten sonra doğrudan tek veya çift steril plakalar üzerinde servis edilir.

Katılaşırken, plaka yapıcılarda ters bir şekilde düzenlenirler ve kullanılana kadar buzdolabında (2-8 ° C) saklanırlar..

Hazırlık sonrası ortam pH 7.2 ± 0.2 ve turuncu kırmızı olmalıdır.

Örnekleri ekmeden önce plakaların temperlenmesini sağlamak önemlidir. Doğrudan orjinal numuneyi tohumlayabilir, materyali agarın bir kısmına boşaltabilir ve oradan oradan da yorgunluktan çıkarabilirsiniz..

Zenginleştirilmiş et suyu kullanılması durumunda, selenit et suyunun bir kısmını geçirin ve drigalski spatula ile ekin.

Aerobiyozda 24 saat boyunca 37 ° C'de inkübe edin.

Tartılacak gram miktarının ve ortamın nihai pH'sinin bir ticari evden diğerine değişebileceğini unutmayın. Ortamın taban plakası her zaman hazırlanması için endikasyonları getirir.

kullanım

Dışkı kültürlerinin analizinde ve artık su örneklerinin, içme suyunun ve yiyeceklerin mikrobiyolojik incelemelerinde sıklıkla kullanılır..

Genellikle çift plakalar hazırlanır, bir tarafta Salmonella-Shigella agar yerleştirilir, diğer tarafta XLD agar.

sınırlamaları

-Bazı Shigella türleri bu ortamda gelişmez. Bu nedenle, bu cinsin primer izolasyonu için tavsiye edilmez.

-Siyah merkezli her açık koloninin Salmonella'nın göstergesi olmadığı söylenemez; Proteus'un bazı suşlarının kolonileri Salmonella'nınkilerden ayırt edilemeyeceğinden doğru bir tanımlama için biyokimyasal testler yapılmalıdır..

-Susuz ortam, çok higroskopik olduğu için çevreye maruz kalma konusunda dikkatli olmalıdır. Bu nedenle kuru ve iyi kapalı bir ortamda tutulmalıdır. Çok kısa süreler için açık.

-Zamanla besiyerindeki safra tuzları çökelebilir ve agar içinde paspaslanmış bir görüntüye benzer bir görüntü oluşturur, ancak bu sonuçları etkilemez.

-Shigella'nın bazı türleri yavaş yavaş laktoz fermente edebilir.

Kalite kontrol

Ortamın doğru çalıştığını kanıtlamak için bilinen veya sertifikalı kontrol suşlarının eklenmesi ve büyümenin beklenen özellikleri karşılayıp karşılamadığını gözlemlemek önerilir..

Bu amaç için E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium veya Enterococcus faecalis.

Beklenen sonuçlar:

Escherichia coli --pembe dışbükey kolonileri.

Enterobacter ve Klebsiella- büyük koloniler ve kırmızı veya pembe mukoid.

Shigella flexneri --Berrak veya renksiz düz koloniler.

Salmonella typhimurium - siyah merkezli renksiz koloniler.

Enterococcus faecalis-- toplam inhibisyon.

referanslar

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratuvarları. Salmonella-Shigella agar. 2009. Şurada mevcuttur: f-soria.es
  2. BD Laboratuvarı. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Erişim: bd.com
  3. Laboratuvarlar Britania. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
  4. Valtek tanılama. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar), 2010. Şuradan erişilebilir: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'un mikrobiyolojik tanısı. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Arjantin.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik tanı 5th ed. Editorial Panamericana S.A. Arjantin.