Pay:
Agar tuzu ve manitol vakfı, hazırlanması ve kullanımı
tuzlu agar ve mannitol veya tuzlu mannitol katı, seçici ve farklı bir kültür ortamıdır. Özellikle patojenik Gram pozitif kokların izolasyonu için Chapman tarafından yaratılmıştır. Staphylococcus aureus.
Bununla birlikte, izole etmek de faydalıdır. Staphylococcus epidermidis, Bu bazen fırsatçı bir patojen olarak bulunabilir ve Staphylococcus saprophyticus, Diğer türlerin yanı sıra, üriner patojenlerin tanınması.
Bazı Enterococcus bu besiyerinde ve bazı Gram pozitif spor oluşturucu basillerde yetişebilir..
Bu ortam, klinik örneklerin analizinde çok faydalıdır, ancak gıdaların mikrobiyolojik incelemelerinde ve diğerlerinin yanı sıra kozmetik ürünleri, ilaçlar gibi endüstriyel ürünlerin kalite kontrolünde de kullanılır..
Tuzlu mannitol agarı, et, triptein, mannitol, sodyum klorür, fenol kırmızısı ve agar ekstreleri ve peptonlarından oluşur.
indeks
- 1 Vakfı
- 2 Hazırlık
- 3 Kullanım
- 4 kalite kontrol
- 5 Nihai düşünceler
- 6 Kaynakça
vakıf
Mannitol agar, sahip olduğu yüksek tuz konsantrasyonu sayesinde seçicidir. Tuzluluk, inhibe edici bir madde olarak işlev görür ve Gram negatif bakterilerin büyümesini önler.
Ayrıca mannitol karbonhidrat ve fenol kırmızısı pH göstergesinin varlığından dolayı da farklıdır. Bundan, mannitol fermente edebilen bakteriler, asitleri üretir, besiyerlerini asitleştirir, kolonileri ve besiyerini sararır..
Öte yandan, mannitol fermente etmeyen koloniler, et ve triptinin özleri ve peptonları tarafından sağlanan besinleri alarak besiyerinde büyür. Oradan bakteri büyümeleri için gerekli karbonu, azotu, vitaminleri ve mineralleri çıkarır..
Bu durumda koloniler zayıf veya güçlü pembe olabilir ve besiyeri aynı renkte kalır veya fuşyaya döner..
Ağar ortama tutarlılık sağlayan maddedir.
hazırlık
Bir litre tuzlu mannitol agar hazırlamak için, tercih edilen ticari evin 111 g susuz ortam maddesi tartılır ve bir fiola kullanılarak 1000 ml damıtılmış su içinde çözülür..
Çözünme işlemini iyileştirmek için ortam sık sık uzaklaştırılarak ısı uygulanır. Bir dakika kaynatın.
Fiolaları 15 dakika 121 ° C'de otoklava yerleştirin..
Zamanın sonunda, fiola otoklavdan çıkarılır, sıcaklık yaklaşık 50 ila 55 ° C olduğunda steril petri kaplarında 15-20 ml arasında bekletilir ve servis edilir..
Sertleşmesine izin verilir, plaketler halinde ters olarak düzenlenir ve kullanılıncaya kadar buzdolabında bekletilir. Bir örnek dikmeden önce, plakanın ortamın sıcaklığını almasını beklemeniz gerekir..
Plakalar, şerit halinde veya bir drigalski spatula ile yüzeyde ekilerek ekilir. Hazırlanan ortamın son pH değeri 7.4 ± 0.2 olmalıdır
Susuz ortamın rengi açık bej ve hazırlanan ortamın rengi turuncu kırmızıdır.
uygulamaları
Yüksek seçiciliği nedeniyle, bu ortam, içinde varlığını aramak isteyen karışık bitki örtüsü ile örnekleri dikmek için idealdir. Staphylococcus aureus, bu cinsin ana patojeni olarak.
Bu anlamda, en sık kullanılan kullanımlarından biri, özellikle asemptomatik taşıyıcıları tespit etmek için, faringeal eksüda ve burun akıntısı örneklerinin mikrobiyolojik analizleridir. S. aureus.
Bazı ülkeler bu analizi gıda satıcısı olarak çalışmak isteyenler için zorunlu bir gereklilik olarak uygulamıştır..
Bu kontrol, taşıyıcıları olan kişilerin işe alınmasını önler S. aureus, Böylece büyük gıda zehirlenmesinden kaçınılır., stafilokokal enterotoksin ile kontamine olmuş gıdaların tüketimi nedeniyle.
Diğerlerinin yanı sıra, yara enfeksiyonlarının, kan kültürlerinin, BOS, bronkoalveolar lavajının tohumlanmasına da eklenebilir..
Tuzlu mannitol agarı idrar kültürlerinin kolonilerini CLED agar veya kan agarından yeniden izole etmek için yararlıdır ve Gram kümelerde Gram-pozitif kokçi ortaya çıkarmıştır.
Diğer uygulamaların yanı sıra, yiyecek, içme suyu, toprak mikrobiyolojik analizlerinde de geçerlidir..
Kalite kontrol
Tuzlu mannitol agar içeren bir plaka grubu hazırlandıktan sonra kalite kontrol yapılması tavsiye edilir. Kontrol suşları büyüme olup olmadığını göstermek için ekilir.
Olumlu bir kontrol olarak, bilinen suşları Staphylococcus aureus. Sarı koloniler geliştirerek tatmin edici bir şekilde büyümesi gerekir ve besiyeri de aynı renk olur.
Aynı şekilde, bilinen bir türün dahil edilmesi uygundur Staphylococcus epidermidis. Pembe koloniler geliştirerek tatmin edici bir şekilde büyümesi gerekir ve ortam aynı renkte kalır veya koyu pembe renkte koyulaşır..
Negatif bir kontrol olarak, bu ortamda büyümemesi gereken suşlar kullanılır. Örneğin, bilinen bir türünü ekebilir Escherichia coli veya Klebsiella pneumoniae. Beklenen sonuç tam inhibisyon, yani büyüme yok.
Ek olarak, aşılanmamış bir plaka inkübe edilmelidir. İçinde büyüme, renk değişimi olmamalıdır.
Diğerlerinin yanı sıra kirlenme, dehidrasyon, renk değişimi gibi bozulma belirtileri varsa plakanın kullanılmaması önemlidir..
Son düşünceler
Tuzlu mannitol agar besiyerini kullanırken, bazı önemli hususlar dikkate alınmalıdır:
-Sarı kolonilerin büyümesini elde etmek, Staphylococcus aureus. Bazı Enterococcus suşlarının bu ortamda ve fermente mannitolün yanı sıra bazı Gram pozitif spor oluşturucu basillerde de büyüyebildikleri unutulmamalıdır..
Bu nedenle, koloniye bir Gram yapmak ve bir katalaz testi yapmak önemlidir..
-Öte yandan, diğer Staphylococcus türlerinden farklı olduğu düşünülmelidir. aureus Ayrıca mannitol fermente edebiliyorlar. Bu nedenle, koloniyi oradan almak ve koagülaz testini yapmak için besleyici bir et suyuna alt kültürlemek önemlidir..
Adam fermantasyon mannitol için klinik öneme sahip Staphylococcus türleri arasında: S. aureus, S. simulatları, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, diğerleri arasında.
Diğerleri değişken bir reaksiyon verebilir, yani bazen pozitif, bazen de negatif. Bazı S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, diğerleri arasında.
-Koagülaz testini gerçekleştirmek için doğrudan mannitol agardan kolonilerin alınması tavsiye edilmez, çünkü ortamın yüksek tuz konsantrasyonu sonuçta karışabilir..
-Son olarak, tuzlu mannitol ile tohumlanmış plakaların 48 saat kadar kuluçkalanması tavsiye edilir, çünkü bazı suşlar S. aureus Çok sık olmasa da, mannitol yavaşça mayalanabilir.
referanslar
- Laboratuvarlar Britania. Mannitol tuzlu ağar. 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
- "Tuzlu Mannitol Agar". Vikipedi, özgür ansiklopedi. 31 Ekim 2018, 19:08 UTC. 17 Ocak 2019, 20:55, şu adresten erişilebilir: en.wikipedia.org.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik tanı (5. basım). Arjantin, Editör Panamericana S.A..
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'un mikrobiyolojik tanısı. 12 ed. Arjantin. Panamericana S.A Editörden
- BD Laboratuvarları BD Mannitol Tuz Agar. 2013. Erişim: bd.com.