Besleyici ağar vakfı, hazırlanması ve kullanımı



besleyici ağar seçici olmayan ve diferansiyel olmayan bir katı kültür ortamıdır. Bu ortamda beslenme açısından talep etmeyen her türlü bakteri ürer.

Basit bir yoldur ve ismine rağmen, beyin kalp infüzyon agarı veya triptikaz soya agarı gibi diğer benzer ortamlara kıyasla daha düşük bir besin değeri içerir..

Laboratuardaki yararı çok çeşitlidir. Esas olarak türlerin alt kültürleri, suşların bakımı, kolonilerin sayımı, kan agarının hazırlanmasında temel olarak kullanılır..

Aynı şekilde, açık bej rengi nedeniyle, yeşilimsi pigment gibi bazı bakteri suşları tarafından üretilen pigmentlerin üretimi Pseudomonas aeruginosa, tarafından üretilen tuğla kırmızı pigment Serratia marcescens oda sıcaklığında, altın sarı pigment Staphylococcus aureus, diğerleri arasında.

Ayrıca, piyasada bulunan en ekonomik büyüyen medyalardan biridir..

indeks

  • 1 Vakfı
  • 2 Kompozisyon
  • 3 Hazırlık
  • 4 Kullanım
    • 4.1 Kanlı agar hazırlanmasında temel olarak
    • 4.2 Spor oluşturan bakterilerin sporülasyonunu uyarır
    • 4.3 Şekil değiştirme bakımı
    • 4.4 Koloni sayımı
    • 4.5 Tanı testlerinin yürütülmesi
    • 4.6 Mezofilik aerobik eğlence amaçlı tuzlu suların geri kazanılması (Plajlar)
  • 5 Kaynakça

vakıf

Daha önce de belirtildiği gibi, bakteriyel gelişim için kısıtlayıcı olmadan ve yorumlanacak karmaşık reaksiyonlar olmadan besleyici maddeler sağlamaya dayanan çok basit bir araçtır..

Ortam yarı saydam olduğundan, derinlemesine ekim yöntemiyle kolonileri saymak için idealdir.

bileşim

Esas olarak et özü veya maya özü, pepton veya pankreas jelatin özeti, agar-agar, sodyum klorür ve damıtılmış sudan oluşur..

Et veya maya ve peptonların özü, bakteri tarafından bir enerji kaynağı olarak kullanılacak büyüme ve büyüme faktörleri olan karbon ve esansiyel minerallerin kaynaklarını (azot, fosfor ve kükürt) temsil eder..

Aynı şekilde, agar-agar, Robert Koch tarafından ortamına katı bir tutarlılık kazandırmak için kullanılan ilk baz bileşik olan jelatinin yerine geçen, bütün büyüyen ortamların temelidir..

Agar, galaktoz, galaktomannan, agaroz ve agaropektinden oluşan bir polisakarittir. 40 ° C'ye ayarlanır ve 100 ° C'ye yakın erir..

Bir kısmı için, sodyum klorür besiyerine bakteri gelişimi için gerekli osmolariteyi sağlar.

Son olarak, su, liyofilize edilmiş bileşikleri hidratlamaya ve çözündürmeye hizmet eder. Nötr pH'a ayarlanmış damıtılmış su kullanılmalıdır. Musluk suyu, ortamdaki fosfatlarla reaksiyona girebilen ve çözünmeyen tuzlar oluşturabilen kalsiyum ve magnezyum içerdiğinden kullanılmamalıdır.

hazırlık

Bir litre besleyici agar için, 31 g susuz ortam tartılmalıdır. Bir fiola içine yerleştirilir ve bir litre distile su içinde çözülür. 5 dakika dinlendikten sonra, bir ısı kaynağının üzerine ısıtın ve 1 veya 2 dakika kaynayana kadar sürekli karıştırın.

Daha sonra fiolaları otoklava yerleştirin ve 121 ° C'de 20 dakika sterilize edin.

Sürenin sonunda, otoklavdan çıkarılır ve bir laminer akış başlığı veya Bunsen brülörü kullanılarak steril petri kaplarında servis edilir..

Petri kapları tek kullanımlık (plastik) ise, ortam aşırı sıcaklıkla deforme olmalarını önlemek için agar yaklaşık 50 ° C sıcaklığa sahipken dağıtılmalıdır..

Katılaşmasını ve ters çevrilmiş bir plaka tutucuda saklanmasına izin verin ve kullanılana kadar 2-8 ° C'de soğutun.

Plakalar ekilmeden önce temperlenmelidir. Besleyici agar plakalar kirlenmiş veya kurutulmuşsa kullanılmamalıdır.

Hazırlanan ortamın pH'ı 7,3 ​​± 0,2'ye ayarlanmalıdır.

uygulamaları

Mikrobiyoloji laboratuvarında kullanılan en basit kültür ortamıdır. Zorlu olmayan bakteri üremesi için formülasyonu mükemmeldir.

Başlıca kullanımları aşağıda açıklanmıştır:

Kan agarının hazırlanmasında bir baz olarak

Bu ortam bazen kanlı agar hazırlamak için bir baz olarak kullanılır, ancak en sık kullanılan baz değildir.

Spor oluşturan bakterilerin sporülasyonunu uyarır

Bu kültür ortamı, örneğin spor yapan bakterilerin sporülasyonunu uyarmak için özellikle yararlıdır. Bacillus sp.

Bunu yapmak için, cinsin bir tür ekilir basil ve 24 saat 37 ° C'de aerobiyozda inkübe edildi. Koloniler büyüdükten sonra, plaka sıcaklığa göre strese maruz kalır, yani sobanın sıcaklığı 44 ° C'ye çıkarılır ve 24 saat daha bırakılır veya 24 saat boyunca buzdolabında bekletilir.

Ekin sonunda kültürler, Gram lekesi veya Shaeffer-Fulton spor lekesi ile uzatılır ve lekelenir. Bunlarda, endosporlu (basil içindeki sporlar) ve exosporlu (basil dışındaki sporlar) basiller gözlenecektir..

Zorlanma bakım

Bazı araştırma laboratuvarları veya üniversite öğretim destek laboratuarları, araştırma çalışmaları veya öğretim uygulamalarının hazırlanmasında bakteri bankasını (bakteriyoteca) kullanmak için, klinik açıdan önemli bakterileri mümkün olduğu kadar uzun süre muhafaza etmelidir. Öğrenciler bu mikroorganizmaları manipüle etmeyi ve tanımlamayı öğrenecekler.

Bu amaçla besleyici ağarın yanı sıra beyin kalp infüzyon agarı da kullanılabilir. Agar hazırlanır, bakalit kapaklı tüplerin içine dökülür ve bir baz üzerine yatırılır, bu şekilde agar, tabanda bir blok ve yüzeyde bir eğim oluşturarak katılaşır (flüt tepe).

Her bir tüp, ekilecek bakteri adı ve tarih belirtilerek etiketlenir. Çerçeve üzerinde, bakterilerin her biri 24 saat boyunca ekilecek ve inkübe edilecek, koloniler büyüdükten sonra, tüpler oda sıcaklığında saklanır.

Ortamın kirlenmesini ve kurumasını ve bakteri ölümünü önlemek için bakteriyoteca 1 ila 3 ay arasında yenilenmelidir..

Sadece zorlu olmayan bakteri bu şekilde korunabilir.

Koloni sayımı

Standart sayım agarı gibi koloni sayımı için özel araçlar olmasına rağmen, bu amaçla, ya bir drigalski spatula ile veya ekimden yüzeyde ekerek besleyici agar kullanılabilir. Bu nedenle, gıda ve suyun mikrobiyolojik analizinde çok faydalıdır..

Diyagnostik testlerin yürütülmesi

Kan içermeyen bir ortam veya başka bir katkı maddesi olduğu için, katalaz testini gerçekleştirmek için bu ortamda yetiştirilen kolonileri almak idealdir..

Benzer şekilde, berrak renginden dolayı, doğrudan tohumlanmış agarın bir alanında, oksidan testlerinin girişim olmadan yapıldığı belirtilmektedir..

Mezofilik aerobik eğlence amaçlı tuzlu suların geri kazanılması (Plajlar)

% 10 deniz suyu ile hazırlanan besin agarı, plaj sularında mezofilik aerobların değerlendirilmesinde yararlıdır..

Bu şekilde, suların bu mikroorganizmalara sahip olduğu gerçek kirlenme seviyesini anlayabiliriz, çünkü bu tür numunelerde, geleneksel şekilde hazırlanan kültür ortamları kullanılırken sonuçlar üst üste gelir.

Bu, Cortez ve ark. 2013 yılında bir araştırma makalesinde.

Bu, aşırı tuzlu bir ortamdan düşük tuzlu bir ortama geçerken bakterilerin maruz kaldığı ani değişim nedeniyle açıklanabilir, bu nedenle mikroorganizmalar yaşadıkları, ancak yetiştirilemeyecekleri bir uyuşukluk durumuna girerler..

referanslar

  1. "Besleyici agar." Vikipedi, özgür ansiklopedi. 13 Eyl 2016, 20:33 UTC. 29 Ara 2018, 21:04 tr.wikipedia.org
  2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'un mikrobiyolojik tanısı. 12 ed. Arjantin. Panamericana S.A Editörden.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik tanı (5. basım). Arjantin, Editör Panamericana S.A..
  4. Cortez J, Ruiz Y, Medine L, Valbuena O. Chichiriviche kaplıcalarının deniz sularında deniz suyu ile hazırlanan kültür ortamlarının sağlık göstergeleri üzerine etkisi, Falcón eyaleti, Venezuela. Rev Soc Microbiol'a Geldi 2013; 33: 122-128
  5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M ve Cardoso M. Suinos için döllenen dozlarda mikrobiyolojik su kalitesi.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Pratik klinik mikrobiyoloji. Cadiz Üniversitesi, 2. baskı. UCA Yayınları Servisi.