MacConkey Agar Vakfı, hazırlık ve kullanım



MacConkey agar Gram negatif basillerin özel izolasyonuna izin veren katı bir kültür ortamıdır. Bu nedenle, seçici bir ortamdır ve ayrıca, ayırıcı bir ortam yapan laktozun fermente olan ve fermente edilmeyen basilleri arasında ayrım yapılmasını sağlar. Mikrobiyoloji laboratuvarında en çok kullanılan kültür ortamlarından biridir..

Bu besiyeri temel olarak aileye ait Gram negatif basillerin izolasyonunda kullanılır. Enterobacteriaceae, fırsatçı ve enteropatojenik türler dahil.

Gastrointestinal sistemde yaşayan, ancak ait olmayan diğer enterik basilleri izole etmek için de kullanılabilir. Enterobacteriaceae, olarak Aeromonas sp, Plesiomonas sp, diğerleri arasında.

Son olarak, ortamda, suda veya toprakta bulunan, ancak bazen gibi fırsatçı patojenler olabilen diğer gram negatif, fermente edilmeyen glikoz basillerini izole edebilir. Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkalin sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, diğerleri arasında.

indeks

  • 1 Vakfı
    • 1.1 MacConkey Agar
  • 2 Hazırlık
  • 3 Geleneksel MacConkey agarın kullanımı
  • 4 MacConkey agar'ın diğer çeşitleri
    • 4.1 Sorbitol ile MacConkey agar
    • 4.2 Kristal menekşe veya tuz içermeyen MacConkey Agar
    • 4.3 Sefoperazonlu MacConkey agar
    • 4.4% 10 deniz suyuyla hazırlanan MacConkey Agar, v / v
  • 5 Kaynakça

vakıf

MacConkey Agar

Bu ortamın temeli, bileşenlerinin açıklamasıyla açıklanabilir, çünkü her birinin bir özelliğini belirleyen bir amacı vardır..

Safra tuzları ve menekşe kristali

Bu anlamda, MacConkey agar karmaşık bir bileşime sahiptir. Her şeyden önce safra tuzları ve menekşe kristali içerir..

Bu elementler, Gram pozitif bakterilerin ve bazı zorlu Gram negatif basillerin büyümesini önlemekten sorumludur. Buna karşılık, bu maddelerden etkilenmeyen Gram negatif basillerin gelişimini desteklemektedir. Bu yüzden seçici bir araç..

Gram-pozitif bakterilerin ve ayrıca çoğu Gram-negatif bakterinin büyümesini de engelleyen diğer ortamlara kıyasla biraz seçici olduğu söylenir..

TCBS agar gibi belirli bir cins için izolasyonu için son derece seçicidir. Vibrio cholerae ve diğer benzer halofilik ve alkalofilik türler.

Peptonlar, polipektonlar ve laktoz

Peptonlar, polipektonlar ve laktoz gibi bu ortamda gelişen mikroorganizmalara gerekli besinleri sağlayan maddeleri içerir..

Laktoz, besiyerinin farklı bir ortam olması için kilit noktadır, çünkü laktozu mayalayabilen mikroorganizmalar güçlü pembe koloniler geliştirir..

Bazı bakteriler laktozu yavaş veya zayıf şekilde mayalayabilir, soluk pembe koloniler geliştirebilir ve pozitif laktoz olarak kalabilir.

Laktozu fermente etmeyenler enerji kaynağı olarak peptonları kullanır, amonyak üretir, besiyerini alkalize eder. Bu nedenle, ortaya çıkan koloniler renksiz veya saydamdır.

PH göstergesi

Renk değişimi, MacConkey agarına sahip başka bir önemli bileşik vasıtasıyla gerçekleştirilir. Bu bileşik, bu durumda nötr kırmızı olan pH göstergesidir..

Laktozun fermantasyonu, karışık asitlerin üretilmesini sağlar. Ortamı, 6,8'in altındaki bir pH'ta asitleştirirler..

Bu, pH göstergesinin yoğun bir pembe tonuna dönmesine neden olur. Rengin yoğunluğu, son pH'a bağlı olarak değişebilir.

Damıtılmış su, sodyum klorür ve ağar

Öte yandan, ortama hidrasyon ve ozmotik denge sağlayan damıtılmış su ve sodyum klorür içerir. Son olarak, ortam, katı ortamın tutarlılığını sağlayan baz olan agar içerir..

Hazırlanan MacConkey agar ortamı, 7.1 ± 0.2'ye ayarlanmış son bir pH'a sahip olmalıdır..

hazırlık

Bir litre MacConkey agar için, 50 g susuz ortam tartılmalı, daha sonra bir fiola içerisine koyulmalı ve bir litre damıtılmış su içinde çözülmelidir. 10 dakika dinlendikten sonra, 1 dakika kaynayana kadar sürekli karıştırılarak ısıtılır..

Daha sonra fiolaları otoklava yerleştirin ve 121 ° C'de 20 dakika sterilize edin. Zamanın sonunda otoklavdan çıkarılır ve 45 ° C sıcaklığa kadar soğumaya bırakılır, daha sonra laminer akış başlığı içinde veya Bunsen beki önünde steril petri kaplarında servis edilir..

Katılaşmasını ve ters çevrilmiş bir plaka tutucuda saklanmasına izin verin ve kullanılana kadar 2-8 ° C'de soğutun.

Proteus cinsinin ürettiği swarning etkisini engelleyen bir MacConkey agar elde etmek için düşük tuzlu bir MacConkey agar kullanılır..

Geleneksel MacConkey ağarının kullanım alanları

MacConkey agar, laboratuvarda alınan klinik örneklerin ekimi için düzenlenmiş tüm kültür ortamlarına dahil edilir. Gıda mikrobiyolojisi ve çevresel mikrobiyolojide de faydalıdır..

Bu ortamda yetişen Gram negatif basillerin çeşitliliği, söz konusu türlerin varsayımsal bir teşhisine yardımcı olan fenotipik özellikleri ifade eder. Örneğin, kolonilerin büyüklüğü, rengi, kıvamı ve kokusu rehberlik edebilecek özelliklerden bazılarıdır..

Bu ortamda, türler Escherichia coli, Klebsiella sp ve Enterobacter sp çökmüş bir safra alanı ile çevrili, güçlü pembe koloniler üretmek.

Kadar bakteri gibi Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp ve Hafnia sp'leri 24 saat sonra renksiz veya 24 -48 saat sonra soluk pembe olarak görünebilirler.

Aynı şekilde, Proteus, Edwadsiella, Salmonella ve Shigella cinsleri renksiz veya saydam koloniler oluşturur..

MacConkey agar'ın diğer çeşitleri

Özel amaçlı olan MacConkey agar'ın başka çeşitleri de vardır. Sonra onlar söz edilir:

MacConkey agar sorbitol ile

Bu besiyeri enteropatojenik suşu ayırt etmek için tasarlanmıştır (Escherichia coli enterohemorajik O157: H7) suşlarının geri kalanının Escherichia coli.

Bu ortam sorbitol için karbonhidrat laktozunu değiştirir. Türleri E. coli enterohaemorajik O157: H7 diğerlerinden farklıdır çünkü sorbitol fermente etmezler ve bu nedenle suşların geri kalanı şeffaf koloniler elde edilir E. coli sorbitol fermente ediyorlarsa ve koloniler güçlü pembe.

Kristal menekşe veya tuz içermeyen MacConkey Agar

Bu agar, kristal menekşe içermediğinden, klasik MacConkey agardan çok farklıdır, Gram pozitif bakteriler büyüyebilir.

Öte yandan, tuz yokluğu, bazı enterik basiller tarafından üretilen agar üzerinde kaynaşma görünümünü engeller. değişen şey, ve böylece Gram pozitif bakteriler dahil, mevcut tüm bakterilerin izolasyonunu kolaylaştırır.

Sefoperazonlu MacConkey agar

MacConkey agar'ın bu çeşidi başlangıçta izole etmek için tasarlanmıştır Laribacter hongkongensis ve sonra bunun izolasyon için yararlı olduğunu fark ettiler Arcobacter butzleri. birHer ikisi de hafif kavisli negatif Gram basilidir, sefoperazona dirençlidir.

Bu bakteriler yakın zamanda Asya ve Avrupalı ​​bireylerde edinilen gastroenterit ve ishalin nedenleri olarak ilişkilendirilmiş ve ortaya çıkan iki güçlü patojen olarak ortaya çıkmıştır..

Antibiyotik, bu bakterilerin gelişimini destekleyen gastrointestinal sistemin eşlik eden florasının inhibe edilmesine izin verir, bunların büyümesi için 72 saat gerekir, çünkü fark edilmeden gitmelerini önler.

MacConkey Agar v / v% 10 deniz suyu ile hazırlanmış

Bu değişken, eğlence amaçlı tuzlu sulardaki (plajlar ve koylar) toplam koli formları ve dışkı koliformları dahil olmak üzere dışkı kontaminasyonunun bakteri sağlığı göstergelerinin değerlendirilmesi için yararlıdır..

Cortez ve arkadaşları 2013, bu şekilde hazırlanan besiyerinin, damıtılmış suyla hazırlanan MacConkey agar kullanımına kıyasla, bu mikroorganizmaların salin ortamında geri kazanılmasını önemli ölçüde arttırdığını göstermiştir..

Bunun sebebi, modifiye edilmiş ortamın fizyolojik olarak "uykuda olan ancak ekili olmayan" bir uyku hali durumunda olan bakterilerin büyümesini uyarmasıdır, bu nedenle geleneksel ortamlarda geri kazanılamazlar..

referanslar

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT ve diğ. Selektif izolasyonu için sefoperazon MacConkey agar kullanımı Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839 - 41.
  2. "MacConkey Agar." Vikipedi, özgür ansiklopedi. 4 Nis 2018, 18:16 UTC. 29 Ara 2018, 15:22 tr.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'un mikrobiyolojik tanısı. 12 ed. Arjantin. Panamericana S.A Editörden.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik tanı (5. basım). Arjantin, Editör Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medine L, Valbuena O. Chichiriviche kaplıcalarının deniz sularında deniz suyu ile hazırlanan kültür ortamlarının sağlık göstergeleri üzerine etkisi, Falcón eyaleti, Venezuela. Rev Soc Microbiol'a Geldi 2013; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Pratik klinik mikrobiyoloji. Cadiz Üniversitesi, 2. baskı. UCA Yayınları Servisi.