Cetrimida ağar vakfı, hazırlık, kullanım
setrimid agarı veya setirimid, bunların izolasyonu için tasarlanmış seçici bir katı kültür ortamıdır. Pseudomonas aeruginosa. Bu türün karakteristik pigmentlerinin üretimini vurgulamaya dayanır ve King, Ward ve Raney tarafından yaratılan Tech agar'ın modifikasyonundan geliştirilmiştir..
Orijinal formül, magnezyum klorür tuzları, potasyum sülfat, pankreas jelatin sindirimi ve agar-agar içermiştir. Formülün modifikasyonu, setirimid (setil trimetil amonyum bromür) ve gliserolün ilave edilmesinden ibarettir..
Setirimid agar, var olan numunelerin mikrobiyolojik incelemeleri için kullanışlıdır. Pseudomonas aeruginosa. Bu bakterinin büyük önem taşıdığı unutulmamalıdır, çünkü normal çevresel mikrobiyotanın bir parçası olmasına rağmen, sıklıkla fırsatçı bir patojen gibi davranır..
Bu nedenle, bu mikropların neden olduğu en yaygın sorunlardan biri hastane enfeksiyonları, yani hastane ortamında meydana gelen ve depresyonlu bir bağışıklık sistemi olan hastalara saldıran enfeksiyonlardır..
Öte yandan, bu mikroorganizmanın neme sahip olması nedeniyle, en savunmasız kirlenme hedefleri şunlardır: yardımcı solunum ekipmanı, ilaçlar, nebülizerler, su kaynakları, klimalar, dezenfektanlar, sabun çözeltileri, enjekte edilebilir çözeltiler, açık yaralar , kateterler, idrar sondaları, diğerleri arasında.
Bu anlamda, setirimid agar, mikrobiyolojik kontrolleri yapmak ve daha önce adlandırılmış olan elementlere bitkileri yapmak için kullanışlıdır..
indeks
- 1 Vakfı
- 1.1 Yorumlama
- 2 Hazırlık
- 3 Kullanım
- 4 Tohumlu
- 5 Sınırlamalar
- 6 kalite kontrol
- 7 Kaynakça
vakıf
Setirimid agar, besiyerinin büyümesini arttırma kabiliyetine dayanır. P. aeruginosa, pigmentlerinin üretimini uyarır ve diğer mikroorganizmaların büyümesini engeller.
Bu özellikler, bileşenlerinin her birinin yerine getirdiği işlevden kaynaklanmaktadır. Mevcut jelatin pepton azot, vitamin ve mineral kaynağı olarak işlev görür. Gliserol veya gliserin karbon kaynağı olarak çalışır.
Cetrimide ise (setil trimetil amonyum bromür), diğer bakterilerin çoğalmasını engelleyen maddedir. P. aeruginosa, aynı cinse ait diğer türler dahil.
İnhibisyon, cetramid, bir çok bakteri dışında çoğu bakterinin plazma zarını dengesizleştiren bir katyonik deterjan gibi davrandığı için oluşur P. aeruginosa ve hayatta kalmayı başaran diğerleri.
Öte yandan, magnezyum klorür ve potasyum sülfat içerir. Bu bileşikler, kapasitelerine bağlı fenotipik ifadeyi uyarır. Pseudomonas aeruginosa aralarında çeşitli pigmentlerin üretilmesi: piyosiyanin, pioverdin, piorubin, piomelanin ve flüoresin. Sonunda, sağlam bir tutarlılık veren agar-agar içerir..
yorumlama
Bu agarda elde edilen büyümenin yorumlanması şu şekilde yapılır:
Mavi-yeşil, yeşil, kahverengi veya kırmızımsı pigmentler üreten normal kenarlı yuvarlak, pürüzsüz kolonilerin ve ayrıca meyveli koku emisyonunun (aminoasetofenon) salınması, bu bakterinin söz konusu numunedeki varlığının varsayımsal bir sonucudur..
Öte yandan, bunun bir göstergesidir P. aeruginosa plaka ultraviyole ışığına maruz kaldığında koloniler üzerinde parlak sarımsı yeşil bir pigmentin gözlenmesi.
Gözlenen her rengin, belirli bir pigmentin üretiminden kaynaklandığı unutulmamalıdır. Mavi-yeşil pigment, piyosiyanin, yeşil ila pioverdin, kırmızımsı ila piorrubin, kahverengi ila piomelanin ve ultraviyole ışığı altında flüoresan altında parlak sarımsı-yeşil flüoresan üretimine tekabül eder..
hazırlık
Susuz ortamın 43 gramını tartın ve distile suda çözün. 10 ml gliserol ekleyin. Karışımı bir ısı kaynağına alın. Tamamen çözülene kadar birkaç dakika kaynatın.
121 ° C'de 15 dakika otoklavlayın. Sıcaklık 50 ° C civarındayken steril petri tabaklarında bekletiniz ve servis yapınız.
Katılaştırmaya, tersine çevirmeye, plakaları sipariş etmeye ve kullanana kadar buzdolabında saklamaya izin verin. Setirimid agar plakalarının dikilmesi için, buzdolabından önceden çıkarılmaları ve oda sıcaklığına gelmelerine izin verilmelidir..
Ortamın nihai pH değeri 7.2 ± 0.2 olmalıdır.
Susuz ortamın rengi bejdir ve preparat opak beyazdır.
uygulamaları
Setirimid agar, içerisindeki her türlü numunenin dikilmesinde kullanılabilir. Pseudomonas aeruginosa. Bu nedenle, mikrobiyolojinin tüm alanlarında (çevresel, endüstriyel, klinik, su ve yiyecek) faydalıdır..
Hastane ortamlarını analiz etmek ve dolayısıyla düzeltici aracılıklar uygulamak büyük önem taşımaktadır, çünkü bu mikroorganizma hasta tarafından kullanılan ekipman, ilaçlar, çözeltiler ve kontamine olmuş malzemelerle hastalara ulaşmaktadır..
Bu şekilde, mikroorganizma, alt solunum yolu, idrar yolu ve immün sistemi baskılanmış hastaların yaralarını enfekte edebilir.
Koloni sayımı da yapılabilir P. aeruginosa mikrobiyal limit testlerinde.
ekili
Setirimid agar, birincil kültür olarak kullanılabilir. Plaka, kenarlarından birinde aşılanır ve oradan plakanın geri kalan kısmına tükenerek dağıtılır. Sıvı numuneler drigalski spatula ile yüzeye ekilebilir.
Plakalar aerobiyozda 37 ° C'de 24 saat inkübasyonda inkübe edilir.
sınırlamaları
-Suşlarının küçük bir yüzdesi Pseudomonas aeruginosa pyocyanin üretmeyin, böylece yanlış bir negatif yorumlayabilirsiniz.
-Klinik öneme sahip bazı Pseudomonas türleri bu ortamda inhibe edilir.
-İçin açıklanan özellikleri gözlemlemek rağmen Pseudomonas aeruginosa, Ek tanımlama testleriyle desteklenmelidirler. Eksik olması gereken bir test oksidaz testidir, pozitif olmalıdır.
-Bazı enterobakteriler bu ortamda büyüyebilir ve sarı bir pigment geliştirebilir, ancak Pseudomonas aeruginosa Plakayı ultraviyole ışığa maruz bırakırken floresan olmadığı.
-Serratia marcescens pembe bir pigment geliştirmeyi ve üretmeyi başarır.
-Setitid agar ile ekilmiş olan plaklar oda sıcaklığında bir süre maruz kalırsa, P. aeruginosa ultraviyole ışık altında gözlenen floresansı kaybedebilirler, ancak özellik 37 ° C'de tekrar inkübe edildiğinde geri kazanılır.
Kalite kontrol
Setirimid agarın düzgün çalışıp çalışmadığını test etmek için kontrol suşları aşağıdaki gibi kullanılabilir: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 ve Staphylococcus aureus ATCC 25923.
Beklenen sonuçlar:
- için P. aeruginosa mavi-yeşilimsi pigment ve pozitif floresan ile iyi büyüme.
- S. maltophilia ve S. aureus kısmen veya tamamen engellenecek.
- Bu bekleniyor Escherichia coli tamamen engellenmek.
referanslar
- Callicó A, Cedre B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Phenotipic ve klinik izolatların serolojik karakterizasyonu Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
- Laboratuvarlar Conda Pronadisa. Setrimid agar bazı. 2014. Uygun fiyat: condalab.com
- Laboratuvarlar Britania. Cetrimida ağarı. 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
- BD Laboratuvarları BD Pseudosel agar (Cetrimide agar). 2013. Erişim: bd.com
- Francisco Soria Melguizo Laboratuvarı, C.A. Setrimid agarı. 2009. Şurada mevcuttur: http://f-soria.es