Temel laktosado suyu, hazırlama ve kullanımları



laktoz suyu özellikle işlenmiş gıdalar, süt ürünleri veya su üzerinde gerçekleştirilen mikrobiyolojik analizlerden Salmonella suşlarının izolasyonunda ön zenginleştirme ortamı olarak kullanılan sıvı, seçici olmayan bir kültür ortamıdır. Bu, Uluslararası Gıdalar için Mikrobiyolojik Özellikler Komisyonu (ICMPF) tarafından önerilmektedir..

Ortam, bakteriyel gelişim için gerekli olan maddeleri jelatin, et özü ve laktoz enzimatik sindirimi içerir. Ek olarak laktoz fermente edilebilir bir karbonhidrattır, bu nedenle bazı koliformlar onu gaz üretimi ile ayırabilir.

Bu nedenle, laktoz suyu, Amerikan Halk Sağlığı Birliği (APHA) tarafından toplam ve fekal koliform bakterilerin varsayımsal çalışması için önerilmekte olup, bunu, En Çok Sayıda (NMP) standart teknikte lauril sülfat triptoz et suyunun yerine mükemmel bir alternatif olarak nitelendirmektedir. (), gıda, süt ve yüzey suları, yeraltı, eğlence, evsel ve endüstriyel atık örneklerinin mikrobiyolojik analizinde kullanılan.

indeks

  • 1 Vakfı
  • 2 Hazırlık
  • 3 Kullanım
    • 3.1 Ön zenginleştirme
    • 3.2 Toplam ve dışkı koliformların analizi
  • 4 Ortamın kalite kontrolü
  • 5 Kaynakça

vakıf

Bazı örneklerin mikrobiyolojik analizleri için, zenginleştirme aşaması, çok düşük miktarda olabilen veya yaşayabilirliğini ihlal eden veya en aza indiren olumsuz koşullar altında olabilecek belirli bir mikroorganizmayı geri kazanabilmek için esastır..

Bu, muhtemelen bulaşmış kuru ve işlenmiş gıdalar durumudur Salmonellas sp. Bu durumlarda, eğer bakteri varsa, ürünün üretim sürecinde fiziksel ve kimyasal olarak kötü muamele görmüşlerdir..

Mikroorganizmaların dehidrasyon, önleyici veya toksik ürünlere maruz kalma gibi olumsuz faktörlere ve diğerleri arasında daha fazla miktarda başka bakterilerin varlığı ile üretilen üst üste gelebilecek şekilde maruz kalmaları sağlanır..

Bu anlamda laktoz et suyu, mikroorganizmanın hasar görmüş yapıları üzerinde onarıcı bir etkiye sahiptir ve tespit edilebileceği şekilde geri kazanılmasını ve çoğalmasını sağlar..

Benzer şekilde laktoz et suyu, canlılığını etkileyebilecek inhibe edici maddeleri seyrelterek gelişmesine izin verme yeteneğine sahiptir. Ek olarak, laktoz et suyunun besinsel bileşimi, büyümesini desteklemek için stratejiktir. Salmonella sp diğer mikroorganizmaların üstünde.

Kesin tanım için, diğer kesin ürünler için ekilmesi gerekir..

Öte yandan, ortamın bileşimi ayrıca gaz üreten laktoz fermente edici mikroorganizmaların tespit edilmesine de izin verir.

hazırlık

Bir litre laktoz et suyu hazırlamak için 13 gram susuz ortam tartılır ve 1000 ml damıtılmış su içinde çözülür..

Ortamın su içinde çözülmesine yardımcı olmak için çözeltiyi bir miktar ısıtabilir, çok fazla değil..

Homojen hale geldiğinde, çözelti aşağıdaki şekilde hazırlanır: et suyu koliform aramak için kullanılırsa, test tüpleri olan bir raf hazırlanır ve bir Durham fermantasyon tüpü baş aşağı yerleştirilir.

Durham tüpü çok önemli bir ayrıntıdır, çünkü koliform oluşumunda gaz oluşumunu ve değerli verileri tespit etmeyi sağlar.

Tüpler hazır olduğunda, içine Durham tüpünün tamamını kaplayacak kadar olması gereken 10 ml laktoz et suyu dağıtılır..

Laktoz çorbası, zenginleştirme öncesi çorba olarak kullanılacaksa, Durham fermantasyon tüpü yerleştirmek gerekli değildir. Bu durumda, 500 ml'lik şişelerde, geniş ağızlı ve termo dirençli bir vidalı kapakla servis edilecek daha fazla miktarda ortam (225 ml) gereklidir..

Daha sonra tüpler veya şişeler, 121 ° C'de 15 dakika boyunca otoklava alınır..

Ortam 25 ° C'de nihai pH 6.9 ± 0.2'de kalmalıdır.

Şaraplar, kullanılıncaya kadar buzdolabında saklanır..

Kullanmadan önce et suları oda sıcaklığında temperlenmelidir.

Öte yandan, laktoz suyu da çift konsantrasyonda hazırlanabilir.

Bazı laboratuvarlar, renk değişikliği ile laktoz fermantasyonunun gerçekleştiği tüpleri göstermek üzere, pH göstergesi olarak laktoz et suyuna mor bromosresol ekler. Bu durumda et suyu mor renk alır ve fermantasyon sararırsa.

uygulamaları

Mikrobiyoloji laboratuvarlarında lakto suyu, güvenilir ve hızlı sonuçlar veren nispeten düşük maliyetli bir ortam olarak kullanılır (24-48 saat).

Su ve gıdadaki toplam ve fekal koliformların analizi için veya Salmonella için zenginleştirme öncesi et suyu olarak kullanılabilir..

Zenginleştirme

Ön zenginleştirme, işlenmiş gıdalarda Salmonella cinsi bakterilerin geri kazanılmasını büyük ölçüde artıran, örneğin zenginleştirilmesinden önceki bir adımdır..

Bunu yapmak için, katı yiyecek (25 gram) veya sıvının (25 mi) numunesi 225 ml laktoz et suyuna ekilir ve 24 ila 48 saat boyunca inkübe edilir. Daha sonra, selenit sistin suyu veya tetratiyonat suyu, zenginleştirilmiş bir ortamda alt kültürlenir. Daha sonra seçici ortam XLD ve SS'ye geçer.

Toplam ve fekal koliformların analizi

Fekal kontaminasyonun bir göstergesi olarak mükemmel bir araçtır.

Bu nedenle, laktoz suyu, koliform çalışmasının varsayımsal aşaması için En Muhtemel Sayı yöntemiyle idealdir..

Büyük miktarda koliformdan şüphelenilen numuneler için, daha az miktarda koliformdan şüphelenilen (1 mi), daha az miktarda koliformdan şüphelenilen numuneler için daha fazla miktarda numune inoküle edilir (10 ml)..

Analiz için 10 dilüsyon yapılmıştır.-1, 10-2, 10-3, kullanılan her konsantrasyon için 3-5 tüplü bir batarya oluşturulması.

Her dilüsyondan, aynı hacim laktoz et sularına ekilir.

Tüpler 24 saat kuluçkada bırakılır. Negatif olan et suları 24 saat daha kuluçkada bırakılır.

Sonuçların yorumlanması iki özellik gözlemlenerek yapılır: birincisi bulanıklığın varlığı veya yokluğu ve bu ortam bir pH göstergesi içermediğinden renkte bir değişiklik olmaz.

İkincisi gaz üretimi ya da değil. Gaz Durham tüpünde, içindeki bir veya daha fazla hava kabarcığının görülmesiyle kolayca gösterilebilir..

Her iki özelliğin de gözlemlenmesi durumunda, yani, gaz üretimi ile bulanıklığın olumlu olduğu düşünülmektedir. Pozitif tüpler doğrulayıcı ortamlara yeniden ekilmelidir (et suyu Brilliant Green% 2 Safra ve EC et suyu).

Ortamın kalite kontrolü

- Ortamın hazırlanmasında, aynı amaca uygun olan koliform çalışması ise, Durham tüplerini yerleştirmeyi unutmamak önemlidir..

- Sterilize etmeden önce ortamı fazla ısıtmayın.

- Sterilize etmeden önce test tüplerinde dağıtın.

- Ortamın 3 aydan fazla hazırlığı varsa kullanmayın..

- Ortamın normal özelliklerinde herhangi bir değişiklik olduğunu fark ederseniz kullanmayın..

- Bir grup laktoz et suyu hazırlarken, olarak bilinen suşları ekerek kalitesini test edin. Escherichia coli, Enterobacter aerogenes , Citrobacter freundii ve Klebsiella pneumoniae. Gaz üretimi ile çok iyi büyüyorlar (pozitif kontrol).

- Ayrıca içerebilir Pseudomonas aeruginosa, zehirlenmeye neden olan mikrop typhimurium veya Enterococcus faecalis, iyi yetişen, ancak gaz üretimi olmadan (Negatif kontrol).

- Susuz ortamın orijinal renginin bej olduğu ve çok açık ve şeffaf sarı hazırlanan ortamın renginde olduğu belirtilmelidir. Renk veya görünümde bir değişiklik varsa, aynı bozulma olabilir.

referanslar

  1. Acevedo R, Severiche C, Castillo M. Biyoloji ve çevresel mikrobiyoloji. (2013) 1. baskı. Kolombiya, Cartagenas Üniversitesi.
  2. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B ve Velázquez O. (2009). Gıdaların Mikrobiyolojik Analizi için Teknikler. 2. baskı UNAM Kimya Fakültesi. Meksika.
  3. Laboratuvarlar Conda Pronadisa. 2017. Laktoz suyu çift konsantrasyon (Avrupa Ecz.)
  4. Fernández-Rendón C, Barrera-Escorcia G. Kolumbakter bakterilerinin Meksika, Xochimilco göl sedimanından ekstraksiyon tekniklerinin karşılaştırılması. Rev. argent. Microbiol.  2013; 45 (3): 180 - 184. Erişim: scielo.org.
  5. Sotomayor F, Villagra V, Cristaldo G, Silva L, Ibáñez L. Merkez, Cordillera ve Capital belediye bölümlerinin ilçelerindeki artezyen kuyu sularının mikrobiyolojik kalitesinin belirlenmesi. Mem. Cienc. sağlık 2013; 11 (1): 5-14. Erişim: scielo.iics.