Baird Parker Agar Vakfı, hazırlık ve kullanım

Baird Parker ağar katı, seçici ve farklı bir kültür ortamıdır. Algılama ve koagülaz pozitif Staphylococcus sayımı için 1962 yılında kuruldu (Staphylococcus aureus).

Kazein pankreas hidrolizatı, et özü, maya özü, lityum klorür, glisin, sodyum piruvat, potasyum tellürit, ağar ve yumurta sarısı emülsiyonundan oluşur.

Baird Parker agar yeteneğine dayanmaktadır S. aureus tellüritin azaltılması ve lesitinaz üretilmesi. Her iki özellik de bu tür için spesifik özelliklere sahip bir koloni oluşturur. Bu nedenle, bu mikroorganizmanın tespitinde büyük etkinlik sunar.

Tipik kolonileri S. aureus onlar siyah veya koyu gri, renksiz bir kenarlık ve kendilerini çevreleyen berrak bir halo ile kendilerini mikroorganizmaların geri kalanından ayırıyorlar. Bu patojen klinik numunelerde, sularda, kozmetiklerde ve çiğ veya pişmiş yiyeceklerde bulunabilir..

Diğerlerinin yanı sıra, gıda zehirlenmesi, haşlanmış cilt sendromu, toksik şok sendromu, apseler, menenjit, septisemi, endokardit gibi neden olduğu patolojilerin teşhisi veya tespiti çok önemlidir..

indeks

• 1 Vakfı
  • 1.1 Beslenme gücü
  • 1.2 Seçmeli
  • 1.3 Diferansiyel
• 2 Hazırlık
  • 2.1 Yumurta sarısı emülsiyonu
  • 2.2 Potasyum tellürit, ağırlıkça% 1 oranında
  • 2.3 Kültür ortamının hazırlanması
• 3 kullanım
  • 3.1 Klinik örnekler
  • 3.2 Yemek örnekleri
  • 3.3 Su örnekleri
• 4 kalite kontrol
• 5 Tavsiye
• 6 Kaynakça

vakıf

Besleyici güç

Kazein pankreas hidrolizatı, et ekstresi ve maya ekstresi genel mikrobiyal gelişim için gerekli besin, vitamin ve mineral kaynakları iken piruvat ve glisin spesifik büyümesini destekleyen bileşiklerdir. Staphylococcus aureus.

selektif

Baird Parker agar seçicidir, çünkü beraberindeki bitki örtüsünün büyümesini engelleyen maddeler içerir, S. aureus. İnhibe edici bileşikler, lityum klorür ve potasyum tellürittir..

diferansiyel

Bu demek oluyor ki ayırt etmek S. aureus Koagülaz Negatif Stafilokokların Geri Kalanı. S. aureus tellüritin siyah metalik serbest tellüruma indirgenmesi, siyah veya koyu gri koloniler oluşması.

Benzer şekilde, yumurta sarısı, substratlara, lesitinaz ve lipaz enziminin varlığının kanıtlanmasını sağlar.. S. aureus Pozitif lesitinazdır ve bu nedenle lesitinin hidrolize edildiğini belirten koloni çevresinde berrak bir halo gözlenir..

Bu anlamda, etrafındaki ışık halo ile parlak siyah veya koyu gri kolonilerin bu agarındaki görünüş, S. aureus. 

Yağış zonu oluşursa, lipaz aktivitesinin göstergesidir. Bazı suşları S. aureus pozitif lipaz ve diğer negatiflerdir.

Bu durumda S. aureus Lipaz pozitifse, siyah veya koyu gri koloninin etrafında bir opak bölge ve sonra lesitinazın etkisiyle açık halo gözlenecektir..

Dışındaki bakteri kolonileri S. aureus Bu ortamda büyüyebilir, etrafında halo olmadan, renksiz veya kahverengi koloniler gelişir.

Atipik siyah koloniler, renksiz kenarlıklı veya kenarlıksız, ancak açık bir halo olmadan da gözlenebilir. Bu koloniler dikkate alınmamalı, S. aureus.

hazırlık

Yumurta sarısı emülsiyonu

Taze bir tavuk yumurtası alın, iyice yıkayın ve% 70 alkol içine 2 ila 3 saat yerleştirin. Daha sonra, yumurta aseptik olarak açılır ve yumurta akı yumurtadan dikkatlice ayrılır. Daha sonra 50 ml sarısı alınır ve 50 ml steril fizyolojik çözelti ile karıştırılır..

Potasyum tellürit,% 1 a / h'da

Bazı ticari evler kullanıma hazır% 1 potasyum tellürit satmaktadır. Orta katılaşmadan önce ortama eklenir..

Bu çözeltiyi laboratuvarda hazırlamak için 1.0 g potasyum tellürit tartılır ve bir kısım su içinde çözülür. Daha sonra su miktarı 100 ml'ye tamamlanır. Solüsyon filtrasyon yöntemi ile sterilize edilmelidir.

Kültür ortamı hazırlanması

Susuz ortamın 60 gramını tartın ve 940 ml distile suda çözün. Karışımı yaklaşık 5 ila 10 dakika dinlendirin.

Çözünme işlemini geliştirmek için ortamı sık sık karıştırarak ısı uygulayın. Bir dakika kaynatın. Otoklavda 121 ° C'de 15 dakika sterilize edin.

45 ° C sıcaklığa ulaşana kadar bekletin ve 50 ml yumurta sarısı emülsiyonu ve 10 ml% 1 tellurit ekleyin. İyice karıştırın ve steril petri kaplarında 15-20 ml servis yapın.

Katılaştırmaya izin verin, plaklarda ters sipariş verin ve kullanılana kadar buzdolabında saklayın.

Hazırlanan ortamın nihai pH değeri 6,8 ± 0,2 olmalıdır.

Bir örnek dikmeden önce, plaka ortam sıcaklığını alana kadar bekleyin. Drigalski spatula ile plakaları çizgili veya ekerek ekin.

Susuz ortamın rengi açık kahverengidir ve hazırlanan ortamın rengi açık sarıdır.

kullanım

Klinik örnekler

Klinik numuneler doğrudan malzemenin bir kısmının plakanın bir ucuna boşaltılarak tohumlanır ve oradan bitkinlikle sıyrılır. 35-37 ° C'de 24 ila 48 saat inkübe edin.

Gıda örnekleri

10 gram yiyecek örneğini tartın ve 90 ml% 0.1 peptonlu su içinde homojenize edin, gerekirse dilüsyonlar hazırlanır. Plakaları, hazırlanan çözeltilerin 0.3 ml'si ile üç kopya halinde inoküle edin ve bir Drigalski spatula ile yüzeye ekin. 35-37 ° C'de 24 ila 48 saat inkübe edin.

Bu metodoloji elde edilen tipik kolonileri saymaya izin verir ve S. aureus g / ml numune başına 10 CFU’nun üstünde.

Şüpheli tutarsanız S. aureus Çok küçük veya eşlik eden çok sayıda flora varsa, örneğin% 10 NaCl ve% 1 sodyum piruvat ile triptikaz soya çorbası içindeki numuneyi zenginleştirmesi önerilir. Bu büyümeyi destekleyecektir S. aureus ve beraberindeki floranın gelişimini engelleyecektir. Bulutlu olan tüpler Baird Parker agarına ekilecek.

Su örnekleri

Bir vakumlu filtreleme sisteminde ve sterilize edildiğinde, 100 ml su filtre edilir ve daha sonra 0.4 mikron mikro gözenekli membran steril bir kelepçe ile çıkarılır ve bir Baird Parker plakasına yerleştirilir. 35-37 ° C'de 24 ila 48 saat inkübe edin Bu teknik, tipik kolonilerin sayılmasını sağlar S. aureus.

Kalite kontrol

Baird Parker agar kalitesini değerlendirmek için, bilinen suşlar, örneğin Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 veya Proteus mirabilis ATCC 43071.

Suşları durumunda S. aureus ATCC'nin tellüriti azalttığı bilinmektedir ve bunlar pozitif lipaz ve lesitinazdır. Bu nedenle, tatmin edici bir gelişme olmalı ve siyah merkez ve renksiz kenarlı dışbükey kolonileri, opak bir halo ve başka bir halo daha dış temizliğe sahip olmalıdır..

Öte yandan, S. epidermidis grimsi-kahverengi ila siyah kolonilerde olan bu ortamda zayıf gelişme beklenir.

için E. coli ve P. mirabilis tamamen veya kısmen engellenmesi bekleniyor. Büyüme durumunda, opak zon olmadan kahverengi koloniler gelişecek, ne de açık halo.

tavsiyeler

-Orta, tellürit ve yumurta sarısı eklendikten sonra ısıtılmamalıdır.

-Yumurta sarısı emülsiyonunun hazırlanması ve besiyerine ilavesi, çok savunmasız bir kirlenme basamağıdır. Aşırı özen gösterilmeli.

-Tipik kolonilerinin varlığı varsa S. aureus söz konusu suşa bir koagülaz testi monte edilerek desteklenmelidir.

-Koagülaz ile ilgili şüpheli sonuçlar varsa, diğer doğrulayıcı testler yapılmalıdır.

-Tipik kolonilerinin varlığını karıştırmamak için dikkatli olun. S. aureus siyah rengin atipik kolonileri ile.

referanslar

1. Wikipedia katılımcıları. Baird-Parker agarı. Vikipedi, Özgür Ansiklopedi. 15 Mart 2017, 19:36 UTC. Erişim: wikipedia.org/ Erişim 18 Şubat 2019.
2. BD Laboratuvarları. Baird Parker Agar. 2006. Erişim: bd.com
3. Laboratuvarlar Britania. Baird Parker agar üssü. 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
4. Francisco Soria Melguizo Laboratuvarları. 2009. Baird Parker Agar. Erişim: http://f-soria.es/Inform
5. Laboratuvarlar Britania. Potasyum tellürit. 2015. Erişim tarihi: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M, Oyarzo C, Escudero C, Cerda-Leal F, Valenzuela F. Taşıma Staphylococcus aureus enterotoksijenik tip A, nazofarengeal smearlerde gıda işleyicileri. Rev Med Şili 2017; 145: 1559-1564
7. Venezüella Standart Covenin 1292-89. (1989). Gıda. İzolasyon ve sayma Staphylococcus aureus. Mevcut:sencamer.gob.ve