Nefelometri ne oluşturduğunu ve uygulamalarını
nephelometry partiküllerin neden olduğu radyasyonun ölçülmesinden oluşur (çözelti içinde veya süspansiyon halinde), böylece yayılan radyasyonun gücünün, olay radyasyonunun yönünden başka bir açıyla ölçülmesidir..
Süspansiyondaki bir partiküle bir ışık huzmesi ile ulaşıldığında, yansıyan ışığın bir kısmı vardır, başka bir kısım emilir, başka bir kısım yönlendirilir ve gerisi iletilir. Bu yüzden ışık, içinde katı parçacıkların bir süspansiyonunun bulunduğu şeffaf bir ortama çarptığında, süspansiyon bulanık gözlenir..
indeks
- 1 Nefelometri nedir??
- 1.1 Radyasyonun çözeltide partiküllerle dağılması
- 1.2 Nefelometre
- 1.3 Sapmalar
- 1.4 Metrolojik özellikler
- 2 Uygulamalar
- 2.1 İmmün komplekslerin tespiti
- 2.2 Diğer uygulamalar
- 3 Kaynakça
Nefelometri nedir??
Radyasyonun çözeltideki parçacıklar tarafından dağılması
Bir ışık ışınının süspansiyondaki bir maddenin parçacıklarına çarptığı anda, ışının yayılma yönü, yönünü değiştirir. Bu etki aşağıdaki hususlara bağlıdır:
1. Parçacık Boyutları (boyut ve şekil).
2. Süspansiyonun özellikleri (konsantrasyon).
3. Dalga boyu ve ışığın yoğunluğu.
4. Olay ışığının uzaklığı.
5. algılama açısı.
6. Ortamın kırılma indisi.
nephelometeri
Nefelometre, bir sıvı numunesinde veya bir gazda asılı kalan parçacıkları ölçmek için kullanılan bir araçtır. Böylece, bir ışık kaynağına göre 90 ° 'lik bir açıyla yerleştirilmiş bir fotosel, süspansiyonda bulunan partiküller tarafından radyasyonu tespit eder.
Ayrıca, parçacıkların fotoseline doğru yansıttığı ışık parçacıkların yoğunluğuna bağlıdır. Diyagram 1, bir nefelometreyi oluşturan temel bileşenleri sunar:
bir. Radyasyon kaynağı
Nefelometride yüksek ışık çıktısı olan bir radyasyon kaynağına sahip olmak hayati önem taşır. Xenon lambalar ve cıva buharlı lambalar, tungsten halojen lambalar, lazer radyasyonu, diğerleri arasında değişen farklı tipler vardır.
B. Monokromatör sistemi
Bu sistem, radyasyonun kaynağı ile küvetin arasına yerleştirilmiştir, böylece, bu şekilde, istenen radyasyona kıyasla, farklı dalga boylarına sahip radyasyon küvetinin üzerindeki insidanstan kaçınılır..
Aksi takdirde, çözeltide floresan reaksiyonları veya ısıtma etkileri ölçümden sapmalara neden olur.
C. Küvet okuma
Genel olarak prizmatik veya silindirik bir kaptır ve farklı boyutlarda olabilir. Bu bir çalışmadaki çözümdür.
D. detektör
Dedektör belirli bir mesafede (genellikle tanka çok yakın) bulunur ve süspansiyonun parçacıkları tarafından yayılan radyasyonu tespit etmekten sorumludur.
E. Okuma sistemi
Genellikle, bu durumda yapılan çalışmadan elde edilen ölçümler olan verileri alan, dönüştüren ve işleyen elektronik bir makinedir..
sapmalar
Her ölçüm, esas olarak aşağıdakiler tarafından verilen bir hata yüzdesine tabidir:
Kirlenmiş kovalar: Küvetlerde, çalışma solüsyonunun dışında, küvetin içinde veya dışında bulunan herhangi bir ajan, dedektöre giden yolda bulunan ışığın ışığını azaltır (hatalı küvetler, küvetin duvarlarına yapışmış toz).
müdahaleler: Bazı mikrobiyal kirletici maddelerin veya bulanıklığın varlığı, ışığın enerjisini yayar ve dağılımın yoğunluğunu arttırır..
Floresan bileşikleriBunlar, radyasyondan etkilendiklerinde, yanlış ve yüksek dağılım yoğunluğu okumalarına neden olan bileşiklerdir..
Reaktiflerin korunması: sistemin yetersiz sıcaklığı çalışmanın olumsuz koşullarına neden olabilir ve bulanık reaktiflerin veya çökeltilerin varlığını teşvik edebilir.
Elektrik gücündeki dalgalanmalar: olay radyasyonunun bir hata kaynağı olmasını önlemek için, düzgün radyasyon için voltaj stabilizatörleri önerilir..
Metrolojik özellikler
Algılanan radyasyonun radyan gücü, parçacıkların kütle konsantrasyonuyla doğrudan orantılı olduğundan, nefelometrik çalışmalar teoride, diğer benzer yöntemlerden (türbidimetri gibi) daha yüksek bir metrolojik hassasiyete sahiptir..
Ek olarak, bu teknik seyreltilmiş çözeltiler gerektirir. Bu, hem soğurma hem de yansıtma olaylarının en aza indirilmesini sağlar..
uygulamaları
Nefelometrik çalışmalar klinik laboratuvarlarda çok önemli bir yer tutar. Uygulamalar, immünoglobulinlerin ve akut faz proteinlerinin, kompleman ve pıhtılaşmanın belirlenmesinden değişir.
İmmün komplekslerin tespiti
Biyolojik bir numune ilgilenilen bir antijeni içerdiğinde, bir bağışıklık kompleksi oluşturmak için bir antikorla (tampon çözeltide) karıştırılır.
Nefelometri, antijen-antikor reaksiyonu (Ag-Ac) tarafından yayılan ışık miktarını ölçer ve bu şekilde bağışıklık kompleksleri tespit edilir..
Bu çalışma iki yöntemle gerçekleştirilebilir:
Nihai Noktanın Nefelometrisi:
Bu teknik, incelenen biyolojik örneğin antikorunun yirmi dört saat boyunca inkübe edildiği uç noktanın analizi için kullanılabilir..
Ag-Ac kompleksi bir nefelometre kullanılarak ölçülür ve dağınık ışık miktarı kompleksin oluşumundan önce yapılan aynı ölçümle karşılaştırılır..
Kinetik nefelometri
Bu yöntemde, karmaşık oluşum hızı sürekli izlenir. Reaksiyon hızı, numunedeki antijenin konsantrasyonuna bağlıdır. Burada ölçümler zamanın bir fonksiyonu olarak alınır, bu nedenle ilk ölçüm "sıfır" zamanında alınır (t = 0).
Kinetik nefelometri en çok kullanılan tekniktir, çünkü çalışma son nokta yönteminin uzun sürelerine kıyasla 1 saatte yapılabilir. Dispersiyon oranı, reaktifin eklenmesinden hemen sonra ölçülür.
Bu nedenle, reaktif sabit olduğu sürece, mevcut antijen miktarı değişim oranıyla doğrudan orantılı olarak kabul edilir..
Diğer uygulamalar
Nefelometri genellikle su kimyasal kalite analizinde, berraklığın belirlenmesi ve arıtma işlemlerinin kontrolünde kullanılır..
Ayrıca, parçacık ışığının konsantrasyonunun, olay ışığında ürettikleri dispersiyondan belirlendiği hava kirliliğini ölçmek için de kullanılır..
referanslar
- Britannica, E. (s.f.). Nefelometri ve türbidimetri. Britannica.com adresinden kurtarıldı
- El Saleh, M. (s.f.). Türbidimetri ve Nefelometri. Pdfs.semanticscholar.org sitesinden alındı.
- Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Technochemical.com adresinden kurtarıldı
- Morais, I. V. (2006). Türbidimetrik ve Nefelometrik Akış Analizi. Repositorio.ucp.p adresinden alındı
- Sasson, S. (2014). Nefelometri ve türbidimetri prensipleri. Notesonimmunology.files.wordpress.com adresinden alındı
- Stanley, J. (2002). İmmünoloji ve Serolojinin Temelleri. Albany, NY: Thompson Öğreniyor. Books.google.co.ve adresinden alındı
- Vikipedi. (N.D.). Nefelometri (tıp). En.wikipedia.org sitesinden alındı